Präsident der Humboldt-Universität zu Berlin

Prof. Dr. Jürgen Mlynek

• 1.  EINLEITUNG UND AUFGABENSTELLUNG

• 2.  THEORETISCHER TEIL

  • 2.1.  Alkoholmarker

    • 2.1.1.  Alkoholmarker im Blut

      • 2.1.1.1.  Carbohydrate-Deficient Transferrin (CDT)

      • 2.1.1.2.  Erhöhte Leberenzymaktivitäten (GGT, GOT/ASAT, GPT/ALAT)

      • 2.1.1.3.  Das mittlere korpuskulare Erythrozytenvolumen (MCV)

    • 2.1.2.  Mögliche Alkoholmarker im Haar

    • 2.1.3.  Ethylglucuronid (EtG)

    • 2.1.4.  Fettsäureethylester (FSEE)

  • 2.2.  Grundlagen der Haaranalytik

    • 2.2.1.  Aufbau und Struktur des Haares

    • 2.2.2.  Die Wachstumsphasen der Haare

    • 2.2.3. Physiologie der Sebumproduktion

    • 2.2.4.  Einlagerung von Substanzen ins Haar

  • 2.3.  Headspace-Festphasenmikroextraktion (HS-SPME)

    • 2.3.1.  Funktionsprinzip und Aufbau der HS-SPME

    • 2.3.2.  Physikalische Grundlagen

    • 2.3.3.  Experimentelle Parameter

    • 2.3.4. Anwendungsgebiete für HS-SPME

  • 2.4.  GC-MS und HPLC-DAD

• 3.  EXPERIMENTELLER TEIL

  • 3.1.  Geräte

    • 3.1.1.  HS-SPME und GC-MS

    • 3.1.2.  HPLC-DAD

    • 3.1.3.  Geräte zur Probenvorbereitung

  • 3.2.  Chemikalien und Standardsubstanzen

    • 3.2.1.  Verwendete Chemikalien

    • 3.2.2.  Fettsäuren

    • 3.2.3. Synthese und Reinheitsprüfung der FSEE und D₅-FSEE

    • 3.2.4.  Herstellung des Phosphatpuffers pH 7,6 nach Sörensen

    • 3.2.5.  Herstellung der Harnstoff/Mercaptoacetat-Lösung

  • 3.3.  Probengewinnung und Asservierung

    • 3.3.1.  Haarproben

    • 3.3.2.  Wischproben

    • 3.3.3.  Pflasterproben

  • 3.4.  Probenvorbereitungs- und Analysenmethoden

    • 3.4.1.  Haare auf FSEE und Squalen

    • 3.4.2.  Wischproben

    • 3.4.3.  Pflasterproben

    • 3.4.4. HS-SPME/GC-MS-Methode

      • 3.4.4.1.  HS-SPME

      • 3.4.4.2.  GC-MS

    • 3.4.5.  HPLC-DAD-Methode

• 4.  ERGEBNISSE UND DISKUSSION

  • 4.1.  Entwicklung der analytischen Verfahren

    • 4.1.1.  Vorbehandlung und Lagerung der Haarproben

      • 4.1.1.1.  Waschen und äußerliches Entfetten der Haarproben

      • 4.1.1.2.  Lagerung der Haarproben

    • 4.1.2.  Extraktion der FSEE aus dem Haar

    • 4.1.3.  Erstellung und Optimierung der HS-SPME-Methode

      • 4.1.3.1.  Zusammensetzung der Probenflüssigkeit

      • 4.1.3.2. Optimierung der Extraktionstemperatur

      • 4.1.3.3.  Optimierung der Extraktionsdauer

      • 4.1.3.4. Auswahl des Faserbeschichtungsmaterials

      • 4.1.3.5.  Einfluss der Desorptionsdauer

      • 4.1.3.6.  Einfluss der Probenmenge auf die HS-SPME-Extraktionsausbeute

    • 4.1.4. Entwicklung der GC-MS-Methode zur FSEE-Bestimmung

    • 4.1.5.  Entwicklung des analytischen Verfahrens zur Squalenbestimmung

    • 4.1.6. Kalibration und Validierung der Methoden

      • 4.1.6.1.  Bestimmung der FSEE-Konzentrationen mittels HS-SPME/GC-MS

      • 4.1.6.2.  Bestimmung des Squalengehalts mittels HPLC-DAD

  • 4.2.  Untersuchungen zum Einlagerungsmechanismus der FSEE ins Haar

    • 4.2.1.  Segmentweise Haaruntersuchungen auf FSEE

    • 4.2.2. Squalenkonzentrationen im Haar

    • 4.2.3.  Untersuchungen von Pflaster- und Wischtests

  • 4.3.  Einflussgrößen auf die FSEE-Konzentrationen im Haar

    • 4.3.1.  Trinkverhalten

    • 4.3.2.  Haarkosmetische Behandlungen

      • 4.3.2.1.  Tönung

      • 4.3.2.2.  Intensivtönung (Coloration)

      • 4.3.2.3.  Färbung

      • 4.3.2.4.  Blondieren/Bleichen

      • 4.3.2.5.  Dauerwelle

      • 4.3.2.6.  Haarwachs

      • 4.3.2.7.  Haarwäsche

      • 4.3.2.8.  Ethanolhaltige Haarkosmetika

      • 4.3.2.9. Direkter Eintrag von FSEE aus handelsüblichen Haarpflegeprodukten

    • 4.3.3.  Untersuchung alternativer Haarsorten

      • 4.3.3.1. Schamhaare

      • 4.3.3.2.  Achselhaare

      • 4.3.3.3.  Barthaare

      • 4.3.3.4.  Andere Körperbehaarung

    • 4.3.4.  Sebumproduktion und Aufnahmekapazität des Haars

  • 4.4.  Relative c_i-FSEE mit Squalen als natürlicher Bezugssubstanz

  • 4.5. Vergleich von EtG- und FSEE-Konzentrationen im Haar

  • 4.6.  Erprobung in der Praxis

    • 4.6.1.  Vergleich von c_i-FSEE im Haar mit anderen Alkoholmarkern

    • 4.6.2. Fahreignungsprüfungen und Gerichtsfälle

    • 4.6.3.  Untersuchung von Haarproben auf Drogen und FSEE

    • 4.6.4. Vergleich von c_i-FSEE und c_EtG im Haar mit Blutparametern

  • 4.7. Relative FSEE-Konzentrationen in Hautoberflächenlipiden

    • 4.7.1.  Wischtest auf FSEE

    • 4.7.2.  Pflastertest auf FSEE

• 5. SCHLUSSFOLGERUNGEN UND AUSBLICK

• 6. ZUSAMMENFASSUNG

• Abkürzungsverzeichnis

• Danksagung

• LITERATURVERZEICHNIS

• ANHANG

• Lebenslauf

• Eidesstattliche Erklärung

• Tabelle 1: Literaturangaben über Bildung, Elimination und Konzentrationen von Fettsäureethylestern in menschlichen Körperflüssigkeiten und Geweben sowie pathogene Wirkungen von Fettsäureethylestern. Zitate siehe auch im Text.

• Tabelle 2: Kommerziell erhältliche SPME-Fasern und deren Anwendungsbereiche.

• Tabelle 3: Übersicht über die kommerziell erworbenen, in dieser Arbeit verwendeten Fettsäuren/Fettsäureethylester.

• Tabelle 4: SIM-Zeitfenster und zur Detektion der FSEE verwendete m/z-Werte.

• Tabelle 5: Verminderung der FSEE-Konzentrationen im Haar bei längerer Lagerung bei Raumtemperatur.

• Tabelle 6: Relative Ausbeuten der Extraktion von Fettsäureethylestern aus einem Alkoholikerhaarpool.

• Tabelle 7: Retentionszeiten R_t unter den in Abschnitt 3.4.4.2 genannten Bedingungen und Molmassen der in dieser Arbeit untersuchten FSEE.

• Tabelle 8: Resultierende FSEE-Konzentrationen der aufgestockten Haarproben bei Zugabe von jeweils 10 µl Kalibratorlösung zu 30 mg Haarpool unter Abzug der Leerwerte.

• Tabelle 9: Nachweis- und Bestimmungsgrenzen der HS-SPME/GC-MS-Methode zur Bestimmung von FSEE im Haar nach DIN 32645 sowie Steigung der Kalibrationsgeraden und lineare Regressionskoeffizienten, die aus den Kalibrationsdaten mit Hilfe des Programms Valistat berechnet wurden. LOD: Nachweisgrenze (limit of detection), LOQ: Bestimmungsgrenze (limit of quantification), R²: linearer Regressionskoeffizient, a: Geradensteigung der Kalibrationsgeraden.

• Tabelle 14: Vergleich der Gesamtkonzentrationen der i-FSEE und der e-FSEE sowie der Konzentrationsverhältnisse der vier Ester, gemessen im Haar von vier Probandengruppen (A: 19 Alkoholiker in Entzugs-behandlung, B: 10 Todesfälle mit Alkoholanamnese, C: 13 Normaltrinker, D: 5 Abstinenzler). Die Angaben beziehen sich auf das kopfnahe Segment (0-6 cm) und wurden aus den Segmentkonzentrationen errechnet.

• Tabelle 15: Daten zu Haarwachstum und Besonderheiten menschlicher Haare [213].

• Tabelle 16: FSEE-Konzentrationen in Kopf-, Scham-, Achsel-, Bart- und Körperhaaren [214].

• Tabelle 17: FSEE-Konzentrationssumme (c_i-FSEE, Summe der Konzentrationen von C14-Et, C16-Et, C18Δ⁹-Et und C18-Et) und Squalenkonzentration c_SQ sowie relative FSEE-Konzentrationen (c_i-FSEE/c_SQ) im Haar von Abstinenzlern, Normaltrinkern und Todesfällen mit exzessivem Alkoholkonsum zu Lebzeiten.

• Tabelle 18: FSEE-Konzentrationssummen c_i-FSEE (C14-Et, C16-Et, C18Δ⁹-Et und C18-Et) und Squalenkonzentrationen c_SQ sowie relative FSEE-Konzentrationen (c_i-FSEE/c_SQ) im Haar von Todesfällen mit unbekannter Alkoholanamnese.

• Tabelle 19: Vergleich von FSEE- und EtG-Konzentrationen für Haarproben von Abstinenzlern, Normaltrinkern, Entzugspatienten und Todesfällen mit exzessivem Alkoholkonsum zu Lebzeiten. Die Konzentrationen beziehen sich auf das kopfnahe Segment 0-6 cm.

• Tabelle 20: Vergleich der FSEE-Konzentrationen im Haar mit qualitativen Befunden für weitere Alkoholmarker und der von den Patienten angegebenen Trinkmenge bei stationär aufgenommenen Entgiftungspatienten.

• Tabelle 21: FSEE- und EtG-Konzentrationen von Haarproben, die im Zuge gerichtlicher Verfahren oder Fahreignungsprüfungen untersucht wurden.

• Tabelle 22: FSEE-Konzentrationen (c_i-FSEE),relative FSEE- und EtG-Konzentrationen (c _i-FSEE/c_SQ und c_EtG) in Haarproben kanadischer Kfz-Führer, die alkoholisiert im Straßenverkehr aufgefallen waren. Werte für FSEE bzw. relative FSEE oberhalb des Cut-off-Wertes sind blau dargestellt.

• Tabelle 23: Pearson-Korrelation zwischen allen gemessenen Größen und den 3 im Haar gemessenen Parametern c_i-FSEE, c _i-FSEE/c_SQ und c_EtG. Die Verteilung der Werte für Phosphatidylethanol, GGT, c_i-FSEE c_i-FSEE/c_SQ und c_EtG wurden vor der statistischen Analyse normalisiert, indem zu den Werten 1 addiert und die Wurzel aus dem Ergebnis gezogen wurde (n = 18).

• Tabelle 24: Relative FSEE-Konzentrationen m_FSEE/m_SQ in Hautoberflächenlipiden mit Squalen als natürlicher Bezugssubstanz, die mittels Wischtest bei Abstinenzlern und Normaltrinkern erhalten wurden im Vergleich mit den Haarkonzentrationen c_i-FSEE/c_SQ.

• Tabelle 25: Relative FSEE-Konzentrationen m_FSEE/m_SQ in Hautoberflächenlipiden, die mittels Wischtest bei einigen Todesfällen erhalten wurden im Vergleich mit den Haarkonzentrationen c_i-FSEE/c_SQ.

• Tabelle 26: Relative FSEE-Konzentrationen m_FSEE/m_SQ in Hautoberflächenlipiden, die mittels Pflastertest mit Squalen als natürlicher Bezugssubstanz erhalten wurden und Angaben zum Trinkverhalten vor und während des Tests für 7 Normaltrinker.

• Abb. 1: Struktur und pharmakokinetische Eigenschaften von Ethylglucuronid.

• Abb. 2: EtG-Konzentrationen im Haar nach Janda et al., aus [40].

• Abb. 3: Bildungs- und Zerfallswege von Fettsäureethylestern. FS = Fettsäure, FS-CoA = Coenzym A-aktivierte Fettsäure, FSEE = Fettsäureethylester.

• Abb. 4: Schematischer Darstellung der Haarwurzel und der Hautschichten, entnommen aus [140].

• Abb. 5: Schichtartiger Aufbau der Haarwurzel; schematischer Aufbau (links) und histologischer Schnitt unter dem Elektronenmikroskop (rechts). M = Medulla, C = Cortex, Cu = Cuticula, IRS = innere Wurzelscheide, ORS = äußere Wurzelscheide. Entnommen aus [141].

• Abb. 6: Das wachsende Haar in der Anagenphase (aus [142], S. 81).

• Abb. 7: Der Haarwachstumszyklus bei menschlichem Kopfhaar, entnommen aus [153].

• Abb. 8: Schematischer Ablauf der Headspace-Festphasenmikroextraktion (HS-SPME).

• Abb. 9: Automatischer Probengeber MPS2 der Firma Gerstel. Der vertikale Arm des xyz-Roboters transportiert ein HS-Vial zunächst zur heizbaren Schüttelvorrichtung, in der die Extraktion stattfindet. Danach wird die SPME-Einheit über dem GC-Injektor positioniert, die SPME-Nadel in den Inlet eingestochen und die Faser zur Desorption aus der Führung geschoben.

• Abb. 10: Durchführung eines Wischtests an der Stirn (linkes Bild) und Anbringen eines Pflasters (Drugs of Abuse Patch der Firma PharmCheck) am Oberarm (rechtes Bild).

• Abb. 11: Einfluss der Extraktionsdauer auf die im n-Heptan/DMSO-Extrakt gemessene FSEE-Konzentration. Es wurden jeweils 50 mg Alkoholikerhaarpool mit 0,5 ml DMSO und 2 ml n-Heptan extrahiert und Doppelbestimmungen durchgeführt.

• Abb. 12: Vergleich der mit der Kurzmethode (30 mg Haare + 40 ng D₅-FSEE in 20 µl DMSO + 0,5 g NaCl + 1 ml Phosphatpuffer pH 7,6 in 10 ml Headspace-Gefäß direkt mit HS-SPME extrahiert; HS-SPME/GC-MS-Methode s. Abschnitt 3.4.4) und nach Vorextraktion mit zweiphasigem Extraktionsmittel (Standardmethode, s. Abschnitt 3.4.1) erhaltenen quantitativen FSEE-Werte im Haar.

• Abb. 13: Einfluss des zugesetzten Salzes (jeweils 0,5 g) auf die GC-MS-Peakflächen von Fettsäureethylestern bei der HS-SPME in Abwesenheit von Haarmatrixbestandteilen. Extraktionstemperatur 100°C, Extraktionsdauer 30 min. Es wurden jeweils Doppelbestimmungen durchgeführt.

• Abb. 14: Abhängigkeit der GC-MS-Peakflächen von der SPME-Extraktionstemperatur bei konstanter Extraktionsdauer von 30 min. Es wurden jeweils Doppelbestimmungen durchgeführt.

• Abb. 15: Abhängigkeit der GC-MS-Peakflächen von der Extraktionsdauer bei konstanter Extraktionstemperatur von 100°C. Es wurden jeweils Doppelbestimmungen durchgeführt.

• Abb. 16: Relative HS-SPME-Extraktionsausbeuten für FSEE aus Haarextrakt bei Verwendung verschiedener Faserbeschichtungsmaterialien (Extraktionsausbeute für PDMS/DVB = 100 %).

• Abb. 17: Absolute Extraktionsausbeuten bei der HS-SPME-Extraktion von FSEE aus Haarextrakten bei Variation der Haareinwaage.

• Abb. 18: Massenspektrum von Ethylstearat (C18-Et) mit Zuordnung der Fragmente. Die Skala für k = 0-13 markiert die durch Abspaltung der entsprechenden Alkylreste vom Molekülion gebildeten Ionen.

• Abb. 20: Massenspektrum von Ölsäureethylester (C18Δ⁹-Et).

• Abb. 21: Totalionenchromatogramm bei Analyse einer Mischung aus Standardlösungen von 32 Fettsäureethylestern (C14-Et, C16-Et, C18Δ⁹-Et und C18-Et wurden aus Gründen der Übersichtlichkeit nicht mit aufgenommen). Injektionsvolumen 1 µl, Konzentration je 31,25 µg/ml.

• Abb. 22: Charakteristische Massenspuren der im Totalionenchromatogramm (TIC) nicht sauber getrennten FSEE mit 18 + 2 C-Atomen (die Ionenspuren wurden aus dem Datenfile, das in Abb. 21 als TIC dargestellt ist, extrahiert).

• Abb. 23: GC-MS-SIM-Chromatogramm für C17-Et (Ethylheptadecanoat, R_t = 9,95 min) und D₅ - C17-Et (D₅-Ethylheptadecanoat, R_t = 9,93 min). Es sind jeweils die Massenspuren für das Molekülion (m/z = 298 u. 303) und die Bestätigungsmassen (m/z = 157 u. 162) dargestellt.

• Abb. 24: SIM-Chromatogramm der Haarprobe SN 529/01 (50 Jahre alt gewordener, männlicher Alkoholiker, postmortale BAK 3,2 mg/g). Es wurden die Ethylester folgender Carbonsäuren identifiziert: iC14 = 12-Methyltridecansäure 0,73 ng/mg, C14 = Myristinsäure 2,58 ng/mg, iC15 = 13-Methylmyristinsäure 0,14 ng/mg, aC15 = 12-Methylmyristinsäure 0,63 ng/mg, C15 = Pentadecansäure 1,32 ng/mg, iC16 = 14-Methylpentadecansäure 0,60 ng/mg, C16 = Palmitinsäure 3,82 ng/mg, iC17 = 15-Methylpalmitinsäure 0,02 ng/mg, aC17 = 14-Methylpalmitinsäure 0,20 ng/mg, C17 = Heptadecansäure 0,41 ng/mg, C18Δ^9,12 = Linolsäure 0,79 ng/mg, C18Δ⁶ = cis-6-Octadecensäure + C18Δ⁹ = Ölsäure 7,85 ng/mg, C18 = Stearinsäure 1,55 ng/mg, C19 = Nonadecansäure positiv, C20 = Arachinsäure 0,12 ng/mg.

• Abb. 25: Strukturformel des Squalens.

• Abb. 26: Massenspektrum des Squalens (a) und ein typisches bei Analyse eines Haarextraktes erhaltenes Chromatogramm unter Verwendung von 5β-Androstan-3,17-dion als innerem Standard (b). Die Squalenkonzentration im Haar betrug 0,53 µg/mg.

• Abb. 27: Mögliche Konformation des Squalenmoleküls.

• Abb. 28: HPLC-DAD-Chromatogramme von Squalen. (a) Injektion einer Squalen-Lösung in Acetonitril (Injektionsvolumen 10 µl, Konzentration 0,1 ng/ml), rechts oben ist das UV-Spektrum des Squalens eingefügt. (b) Haarextrakt, Squalenkonzentration im Haar 0,27 ng/mg.

• Abb. 29: FSEE-Summenkonzentrationen (c_i-FSEE), Squalenkonzentrationen (c_SQ) und relative FSEE-Konzentrationen c_{i FSEE}/c_SQ gemessen in der Haarprobe eines Alkoholikers unter Variation der Extraktionsdauer.

• Abb. 30: Mögliche Einlagerungswege für FSEE in das Haar.

• Abb. 31: Konzentrationsprofile im Haar zweier Alkoholentzugspatienten (HV01 und HV05) für aus dem Haar extrahierte FSEE (i-FSEE) und aus den n-Heptan-Waschlösungen erhaltene FSEE (e-FSEE).

• Abb. 32: Nach Extraktion des zuvor gewaschenen Haars erhaltene Haarkonzentrationen (c_i-FSEE) für Probanden aus verschiedenen Konsumentengruppen. Der Cut-off-Wert für c_i-FSEE von 1 ng/mg ist mit Pfeil und gestrichelter Linie markiert. Untersuchte Haarlänge: 6 cm oder kürzer, bei segmentweise unterrsuchten längeren Haarproben wurden die durch gewichtete Mittelwertbildung erhaltenen Werte für den Abschnitt von 0-6 cm von der Kopfhaut dargestellt.

• Abb. 33: FSEE-Konzentrationen der Haarextrakte (i-FSEE) und der Waschflüssigkeiten (e-FSEE) bezogen auf die Haareinwaage vor und nach haarkosmetischer Behandlung. Die Behandlungen wurden mit unterschiedlichen Alkoholikerhaarproben durchgeführt.

• Abb. 34: Vergleich der FSEE-Konzentrationen einer Normaltrinkerprobe im Haarextrakt (i-FSEE) und in den Waschflüssigkeiten (e-FSEE) vor der Behandlung, nach dem Waschen und nach anschließender Dauerwellbehandlung.

• Abb. 35: FSEE-Konzentrationen im Haar und in der Waschflüssigkeit nach Anwendung von Haarwachs a) bei regelmäßiger Anwendung nach Haarwäsche (2 x wöchentlich). Es wurden zwei Segmente untersucht. b) bei einmaliger Behandlung einer Abstinenzlerhaarprobe mit anschließender Haarwäsche. c) bei einmaliger Behandlung einer Alkoholikerhaarprobe.

• Abb. 36: Konzentrationsverlauf für die FSEE-Konzentrationen im Haarextrakt (c_i-FSEE) und in der Waschflüssigkeit (c_e-FSEE) für 40 Haarwäschen bei einer Normaltrinkerprobe (links) und für 20 Haarwäschen bei einer Alkoholikerhaarprobe (rechts).

• Abb. 37: Vergleich der c_i-FSEE im Haar vor und nach zweimonatiger Behandlung einer Kopfhälfte mit ethanolhaltigem Haarwasser bei drei Probanden. Die Haarproben der Probanden 1 und 3 wurden segmentweise untersucht

• Abb. 38: Einfluss eines ethanolhaltigen Deodorants (A) bzw. Haarsprays (B) auf die FSEE-Konzentrationen im Haarextrakt zweier Probanden. Fall A: Normaltrinker, Brusthaar mit Deodorant behandelt, Haupthaar unbehandelt. Fall B: Abstinenzler, das untersuchte Kopfhaar wurde regelmäßig mit Haarspray behandelt.

• Abb. 39: Vergleich der c_i-FSEE für Haupthaar- und Schamhaarproben derselben Probanden mit Trendlinie. Diagramm B stellt eine Ausschnittsvergrößerung von Diagramm A dar.

• Abb. 40: FSEE-Konzentrationen c_i-FSEE, Squalenkonzentrationen c_SQ und relative FSEE-Konzentrationen c_{i FSEE}/c_SQ in den Segmenten einer Alkoholikerhaarprobe (a) und einer Normaltrinkerhaarprobe (b).

• Abb. 41: Altersabhängigkeit der Squalenkonzentration im Haar erwachsener Normaltrinker und Abstinenzler. Es wurden 11 Abstinenzler, 16 Normaltrinker und 25 Todesfälle, die unauffällige FSEE-Konzentrationen zeigten, einbezogen (n = 52). Die Trendlinie ist schwarz eingezeichnet.

• Abb. 42: Segmentweise Analyse auf FSEE (weiße Balken) und EtG (schwarze Balken) bei vier Haarproben von in Alkoholentzugspatienten. Die Histogramme sind in logarithmischer Form dargestellt.

• Abb. 43: Chromatogramme, die bei Messung der Hautoberflächenlipidprobe eines Alkoholikers (Fall-Nr. 383/03) erhalten wurden. (a) zeigt die Ionenspuren der GC-MS-SIM-Analyse auf FSEE. Die Signale für die deuterierten Verbindungen sind mit „(D)“ gekennzeichnet, es sind nur die Massenspuren der Molekülionen dargestellt. (b) zeigt das bei der Squalenbestimmung erhaltene HPLC-DAD-Chromatogramm. Die Probe enthielt 15 ng Ethylmyristat, 74 ng Ethylpalmitat, 43 ng Ethyloleat, 12 ng Ethylstearat und 27 µg Squalen, m_FSEE/m_SQ = 5,36 ng/µg.

• Abb. 44: Relative FSEE-Konzentrationen m_FSEE/m_SQ in mittels Wischtest gewonnenen Hautoberflächenlipiden von Abstinenzlern, Normaltrinkern sowie von Todesfällen mit bekanntem chronischem Alkoholabusus und Todesfällen ohne klaren Hinweis auf Alkoholmissbrauch.

• Abb. 45: Relative FSEE-Konzentrationen m_FSEE/m_SQ in den Hautoberflächenlipiden, die täglich von der Stirn der Probanden N08 (62, m) und N12 (33, m) mit Hilfe des Wischtests gewonnen wurden.

• Abb. 46: Relative FSEE-Konzentrationen m_FSEE/m_SQ in den Hautoberflächenlipiden, die täglich mittels Wischtest von der Stirn einer sonst wenig trinkenden psychiatrischen Patientin nach einer schweren Alkoholintoxikation gewonnen wurden.