Aus dem Institut für Transfusionsmedizin
der Humboldt-Universität zu Berlin

DISSERTATION

Vergleich von konstanter und periodischer Trenngrenze bei der Thrombozytapherese mit dem Blutzellseparator Fresenius AS 104

Zur Erlangung des akademischen Grades
Doctor medicinae (Dr. med.)

Vorgelegt der Medizinischen Fakultät Charité
Der Humboldt-Universität zu Berlin

von
Bettina Balke

aus Berlin

Dekan: Prof. Dr. med. J. W. Dudenhausen

Gutachter:
1. Prof. Dr. Dr. H. Kiesewetter
2. Prof. Dr. P. Hellstern
3. Prof. Dr. G. Zietz

eingereicht: 10.04.2002

Datum der Promotion: 28.10.2002

Inhaltsverzeichnis

• Kapitel I Einleitung
  • 1.  ALLGEMEINE EINLEITUNG
  • 2.  HERLEITUNG EINER AUFGABENSTELLUNG
• Kapitel II Material und Methoden
  • 1.  Charakterisierung der Probanden
  • 2.  Charakterisierung der Thrombozytaphereseverfahren
    • 2.1. Grundprinzipien und Aufbau der zweistufigen Thrombozytenseparationskammer des Blutzellseparators FRESENIUS AS 104
    • 2.2.  Die Trenngrenzenposition
      • 2.2.1. Konstante und periodische Trenngrenzenposition
    • 2.3. Durchführung der Thrombozytapherese
  • 3. Probengewinnung
    • 3.1. Gewinnung von Spenderblut vor der Thrombozytapherese
    • 3.2. Gewinnung von Spenderblut nach der Thrombozytapherese
    • 3.3. Gewinnung von Thrombozytenkonzentrat nach der Thrombozytapherese
  • 4.  Messmethoden
    • 4.1. Durchflußzytometer FACScan
      • 4.1.1.  Präparation des Thrombozytapheresekonzentrates vor der durchfluß-zytometrischen Messung
      • 4.1.2. Messung und Datenerfassung am Durchflußzytometer
    • 4.2.  Blutbildautomat Abbott Cell-Dyn 3500
      • 4.2.1. Präparation des Thrombozytapheresekonzentrates vor der Messung
    • 4.3. Nageotte-Zählkammer
      • 4.3.1.  Präparation des Thrombozytapheresekonzentrates vor der Zellzählung in der Zählkammer
      • 4.3.2. Auszählung der Leukozyten in der Nageotte-Zählkammer; Berechnung
  • 5.  Auswertung
    • 5.1. Parameterermittlung und Berechnungen
  • 6. Statistik
• Kapitel III Ergebnisse
  • 1.  Einteilung der Meßergebnisse
    • 1.1. Ausgangswerte
    • 1.2.  Thrombozytaphereseparameter
    • 1.3. Effektivitätsparameter
      • 1.3.1.  Thrombozytenausbeute
      • 1.3.2.  Separationsleistung und Separationseffizienz
      • 1.3.3. Leukozytenkontamination
  • 2. Korrelation der drei Meßmethoden: modifizierte Nageotte-Zählkammer, FACScan und Blutbildautomat CD 3500 Abbott
    • 2.1. Korrelation zwischen Nageotte-Kammer und Blutbildautomat Abbott CD 3500
    • 2.2. Korrelation zwischen Nageotte-Kammer und FACScan
• Kapitel IV Diskussion
  • 1. Methodenvergleich Leukozytenzählung
  • 2. Vergleich der Apherese-Methoden
• Kapitel V Zusammenfassung
• KAPITEL VI LITERATURVERZEICHNIS
• Kapitel VII Danksagung
• Kapitel VIII Eidesstattliche Erklärung

Tabellen

• Tabelle 1: Allgemeine Daten der Thrombozytapheresespender
• Tabelle 2: Hämatologische Daten der Thrombozytapheresespender
• Tabelle 3 : Parameter und Parametereinstellungen am Zellseparator
• Tabelle 4: Mittelwerte, Standardabweichungen, minimale und maximale Werte der entsprechenden Meßgrößen aus beiden Separationsverfahren
• Tabelle 5: Mittelwerte, Standardabweichungen, minimale und maximale Werte der Thrombozytaphereseparameter aus beiden Separationsverfahren
• Tabelle 6: Mittelwerte, Standardabweichungen, minimale und maximale Werte der einzelnen Meßgrößen aus beiden Separationsverfahren
• Tabelle 7: Leukozytenkonzentrationen in den Thrombozytapheresekonzentraten (konstante und periodische Trenngrenze) nach der Messung am Blutbildautomat Abbott CD 3500 bzw. nach Zählung in der Nageotte-Kammer
• Tabelle 8: Leukozytenkonzentrationen in den Thrombozytapheresekonzentraten (konstante und periodische Trenngrenze) nach der Messung am Durchflußzytometer bzw. nach Zählung in der Nageotte-Zählkammer
• Tabelle 9: Leukozytenkontaminationen (WBC) in den Thrombozytapheresekonzentraten (Nageotte-Kammer und FACScan) für die konstante und periodische Trenngrenzenposition
• Tabelle 10: Auswirkungen der Trenngrenzenposition(TG) auf die Plättchenausbeute (PLT), die Separationseffizienz (SE) und die Leukozytenkontamination (WBC) in den Thrombozytapheresekonzentraten (TE)

Bilder

• Abbildung 1: zweistufige Thrombozytenseparationskammer des Blutzellseparators Fresenius AS 104
• Abbildung 2 a: grafische Darstellung der Leukozytenpopulationen in Abhängigkeit von Streulichtparametern und Antigen-Expression im Vollblut
• Abbildung 2b: grafische Darstellung der Leukozytenpopulationen in Abhängigkeit von Streulichtparametern und Antigenexpression im verdünnten Vollblut (1 : 1000)
• Abbildung 3: Häufigkeitsverteilung für den Parameter Thrombozytenertrag für beide Separationsverfahren
• Abbildung 4: Häufigkeitsverteilung für den Parameter Separationsleistung für das Separationsverfahren mit periodischer und konstanter Trenngrenze
• Abbildung 5: Häufigkeitsverteilung des Parameters Separationseffizienz in beiden Separationsverfahren
• Abbildung 6: Größe der Leukozytenkontaminationen (Nageotte-Zählkammer) in beiden Separationsverfahren
• Abbildung 7: Größe der Leukozytenkontaminationen (FACS) im Separationsverfahren mit konstanter und periodischer Trenngrenze
• Abbildung 8: Grafischer Vergleich der Leukozytenkonzentrationen in den Thrombozyt-apheresekonzentraten (Nageotte-Kammer und Blutbildautomat CD 3500)
• Abbildung 9: Grafischer Vergleich der Leukozytenkonzentrationen in den Thrombozyt-apheresekonzentraten (Nageotte-Kammer und FACS)
• Abbildung 10: Vergleich von Nageotte-Kammer und FACScan-Methode: Messung 1 bis 50
• Abbildung 11: Vergleich von Nageotte-Kammer und FACScan-Methode: Messung 51 bis 100