Aus der Klinik für Neonatologie Campus Charité Mitte
der Medizinischen Fakultät Charité
der Humboldt-Universität zu Berlin

Dissertation

Regulation der Expression von Scavenger Receptor BI (SR-BI) und des bidirektionalen Cholesterolflux durch den Cholesterol- und Vitamin-E-Gehalt in HepG2-Zellen und High Density Lipoproteinen

Zur Erlangung des akademischen Grades
Doctor medicinae (Dr. med.)

vorgelegt der Medizinischen Fakultät Charité
der Humboldt-Universität zu Berlin

von
Payman Barikbin
aus Elmshorn

Dekan:
Prof. Dr. med. M. Paul

Gutachter:
1. Prof. Dr. sc. Nat. B. Rüstow
2. Prof. Dr. med. E. Köttgen
3. Prof. Dr. rer. Nat. F. Spener

Datum der Promotion:18.10.2004

Inhaltsverzeichnis

• 1.  EINLEITUNG
  • 1.1 Vitamin E
  • 1.2 Cholesterol
  • 1.3 Scavenger Receptor B I
• 2.  AUFGABENSTELLUNG
• 3.  MATERIAL UND METHODEN
  • 3.1 Materialien
    • 3.1.1 Chemikalien
    • 3.1.2 Zellinien
  • 3.2 Geräte und Hilfsmittel
  • 3.3 Methoden
    • 3.3.1 Lipoprotein-Gewinnung
    • 3.3.2 Proteinbestimmung
    • 3.3.3 Cholesterolbestimmung
    • 3.3.4 Vitamin-E-Bestimmung
    • 3.3.5 Effekt des Vitamin-E-Gehalts von HDL auf die Aufnahme von Cholesterol und Vitamin E in HepG2-Zellen
    • 3.3.6  Einfluß des zellulären Vitamin-E-Gehalts auf die Expression von PKCα und SR-BI und auf den Cholesterolefflux
    • 3.3.7 Einfluß des zellulären Cholesterolgehalts auf die Expression von PKCα und SR-BI und auf den Cholesterolefflux
    • 3.3.8 Einfluß der zellulären Cholesterolanreicherung auf die Vitamin-E- und Cholesterol-Aufnahme aus HDL
    • 3.3.9 Membranpräparation
    • 3.3.10 Diskontinuierliche SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE)
    • 3.3.11  Western Blot
    • 3.3.12 Statistik
• 4.  ERGEBNISSE
  • 4.1 Effekt des Vitamin-E-Gehalts von HDL auf die Aufnahme von Cholesterol und Vitamin E in HepG2-Zellen
  • 4.2  Einfluß des zellulären Vitamin-E-Gehalts auf die Expression von PKCα und SR-BI und auf den Cholesterolefflux
  • 4.3  Einfluß des zellulären Cholesterolgehalts auf die Expression von PKCα und SR-BI und auf den bidirektionalen Cholesterolflux
• 5.  DISKUSSION
  • 5.1 Effekt des Vitamin-E-Gehalts von HDL auf die Aufnahme von Cholesterol und Vitamin E in Hep G2-Zellen
  • 5.2  Einfluß des zellulären Vitamin-E-Gehalts auf die Expression von PKCα und SR-BI und auf den Cholesterolefflux
  • 5.3  Einfluß des zellulären Cholesterolgehalts auf die Expression von PKCα und SR-BI und auf den bidirektionalen Cholesterolflux
• 6.  ZUSAMMENFASSUNG
• 7. LITERATUR
• Abkürzungen
• Danksagung
• Lebenslauf
• Eidesstattliche Erklärung

Tabellen

• Tabelle 4.1.1. Zellulärer Cholesterolgehalt der mit HDL von ansteigendem VitE-Gehalt inkubierten HepG2-Zellen.

Bilder

• Abbildung 1 . Vitamin-E- und Cholesterol-Aufnahme aus HDL in HepG2-Zellen. A:
• Abbildung 2. Cholesterolefflux aus HepG2-Zellen zu HDL als Akzeptor.
• Abbildung 3. Effekt der Vitamin-E-vermittelten Erniedrigung der SR-BI-Expression auf den Cholesterolefflux.
• Abbildung 4. Effekt der zellulären Cholesterolanreicherung auf die Expression von SR-BI und PKC und den Cholesterolefflux.
• Abbildung 5. Vitamin-E- und Cholesterol-Aufnahme aus HDL in Cholesterol-angereicherte und Kontrollzellen.
• Abbildung 6. Effekt der Cholesterolverarmung von HepG2-Zellen auf die Expression von SR-BI und PKC.