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Anhang A. 6. ANHANG

EIGENANTEIL AN DEN VORGESTELLTEN ARBEITEN

Anlage 1,	Hanein, D., Matlack, K.E., Jungnickel, B., Plath, K., Kalies, K.U., Miller, K.R.,
	Rapoport, T.A., Akey, C.W. (1996). Oligomeric rings of the Sec61p complex
	induced by ligands required for protein translocation. Cell 87:721-732.

• Reinigung des Sec61p-Komplexes und des Sec-Komplexes aus ER-Membranen der Hefe
• Dissoziation des Sec-Komplexes in seine Teilkomplexe und deren anschließende Aufreinigung
• Isolation von Ribosomen aus dem Cytosol von Hefen
• Rekonstitution der Proteinkomplexe in Proteoliposomen und Ribosomenbindung

Anlage 2,	Finke, K.*, Plath, K.*, Panzner, S., Prehn, S., Rapoport, T.A., Hartmann, E.,
	Sommer, T. (1996). A second trimeric complex containing homologs of the Sec61p
	complex functions in protein transport across the ER membrane of S. cerevisiae.
	EMBO J. 15:1482-1494. (*both authors contributed equally to this work)

• in vitro Translokationsassays mit ER-Membranen der sbh1-, sbh2- und sbh1/sbh2- Deletionsmutanten und dem posttranslationalen Translokationssubstrat Prepro-Alphafaktor
• Akkumulation von Translokationssubstraten im Cytosol der sbh1-, sbh2- und sbh1/sbh2- Deletionsmutanten
• Reinigung des Ssh1p-Komplexes aus dem Digitoninextrakt und der RAMP-Fraktion sowie Coimmunopräzipitationsexperimente mit gegen Sec61p, Sbh1p, Sss1p, Ssh1p, Sbh2p, Sec62p, Sec71p und Sec72p gerichteten Antikörpern

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• Reinigung des Ssh1p-Komplexes und des Sec61p-Komplexes aus dem Digitoninextrakt von ER-Membranen der sbh1-, sbh2-, sbh1/sbh2- und ssh1/sbh1-Deletionsmutanten und Coimmunopräzipitationsexperimente

Anlage 3,	Plath, K., Mothes, W., Wilkinson, B.M., Stirling, C.J., Rapoport, T.A. (1998).
	Signal sequence recognition in posttranslational protein transport across the
	yeast ER membrane. Cell 94:795-807.

• alle gezeigten Experimente, bis auf die von Dr. Walter Mothes stammenden, in Abbildung 3F und 4D gezeigten Quantifizierungen zur Signalsequenzerkennung im cotranslationalen Säugersystem, sind von mir durchgeführt worden
• Dr. Josef Brunner stellte die Quervernetzungsreagenzien und Dr. Barrie Wilkinson und Dr. Colin Stirling die Sec61-Hefemutanten zur Verfügung; die Stopcodon enthaltenden Prepro- Alphafaktor-Mutanten wurden gemeinsam mit Dr. Walther Mothes hergestellt

Anlage 4,

Das Sec61p-Oligomer bindet an den Austrittsort der naszierenden Kette am Ribosom

• Reinigung des Sec61p-Komplexes aus dem Digitoninextrakt von ER-Membranen der Hefe
• Etablierung einer Methode, die die spezifische und effiziente Bindung des Sec61p-Komplexes an Ribosomen, die Entfernung ungebundener Sec61p-Komplexe und freier Ribosomen und die anschließende Analyse der Probe mit Kryo-Elektronenmikroskopie erlaubt
• die Elektronenmikroskopie und Ermittlung der dreidimensionalen Struktur des Ribosom-Sec61p- Komplexes wurde von Dr. Jean Francois Menetret, Dr. David Morgan und Dr. Chris Akey (Boston-University) durchgeführt

Anlage 5,	Die cytosolischen Interaktionspartner des Prepro-Alphafaktors werden bei
	seiner Bindung an den Sec-Komplex freigesetzt

• alle gezeigten Experimente sind von mir durchgeführt worden
• Dr. Josef Brunner (ETH Zürich) stellte das Quervernetzungsreagenz zur Verfügung

Dr. Tom Rapoport hat an allen Arbeiten einen wesentlichen Anteil, besonders bei der Auswahl der Projekte, bei der Fokussierung auf entscheidende Fragestellungen und dem Schreiben der Veröffentlichungen.

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