Tellgmann, Gabriele: Messung der Reaktionsenthalpie von Teilreaktionen der visuellen Kaskade

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Liste der verwendeten Chemikalien

Nukleotide :

   

GTP

Guanosin-5’-triphosphat Trinatriumsalz Monohydrat

(FLUKA)

(Reinheit laut Hersteller: ~ 97 %)

[das für die Messungen verwendete GTP wurde von der Arbeitsgruppe von

A. Wittinghofer MPI, Dortmund) über eine Q-Sepharose-Säule aufgerein]igt

GTPgS

Guanosin-5’-O-(3-thiotriphosphat) Tetralithiumsalz (Reinheit laut Hersteller: > 85 % [HPLC])

(Calbiochem)

GDP

Guanosin-5’-O-diphosphat Dilithiumsatz (Reinheit laut Hersteller: 80 % )

(BOEHRINGER)

ATP

(Reinheit laut Hersteller: > 97 % )

(SERVA)

Pufferchemikalien:

   

BTP

1, 3-Bis[tris-(hydroxymethyl)-methylamino]propan

(FLUKA)

HEPES

4-(2-Hydroxyethyl)-piperazin-1-ethansulfonsäure

(FLUKA)

K2HPO4

di-Kaliumhydrogenphosphat, wasserfrei

(MERCK)

KH2PO4

Kaliumdihydrogenphosphat

(MERCK)

Na2HPO4

di-Natriumhydrogenphosphat

(FLUKA)

PIPES

Piperazin-1, 4 -bis(2-ethansulfonsäure)

(MERCK)

Tris

Tris(hydroxymethyl)-aminomethan

(MERCK)

sonstige Chemikalien:

Aprotinin

(Boehringer)

Benzamindin

Benzamidinhydrochlorid

(FLUKA)

BSA

Bovine Albumin, fettsäurefrei

(SIGMA)

DTT

1,4-Dithio-DL-threitol

(FLUKA)

EDTA

Ethylendiamintetraessigsäure Na4-Salz · 1.5 H2O

(SERVA)

Harnstoff

(FLUKA)

Leupeptin

Nr. L 2884

(SIGMA)

Mg(Az)2

Magnesiumacetat-Tetrahydrat

(MERCK)

MgCl2

(FLUKA)

NaCl

(FLUKA)

NH2OH

Hydroxylaminhydrochlorid

(FLUKA)

PMSF

Phenylmethansulfonylfluorid

(FLUKA)

Saccharose

Saccharose zur Dichtegradientenzentrifugation

(MERCK)


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Verwendete Pufferlösungen

(sämtliche pH-Werte wurden bei Raumtemperatur gemessen)

Meßpuffer

   

BTP-Puffer

pH 7.5

20 mM BTP, 130 mM NaCl, 1 mM MgCl2, 1 mM DTT

BTP-Puffer

pH 6.0

20 mM BTP, 130 mM NaCl, 1 mM MgCl2, 1 mM DTT

Phosphatpuffer

pH 7.5

41 mM K2HPO4, 10 mM KH2PO4, 80 mM NaCl, 1 mM MgCl2, 1 mM DTT

Phosphatpuffer

pH 6.0

6 mM K2HPO4, 50 mM KH2PO4, 100 mM NaCl, 1 mM MgCl21 mM DTT,

Puffer T

pH 7.5

20 mM Tris, 5 mM MgCl2

Puffer zur Präparation

Puffer I

pH 7.5

20 mM BTP, 120 mM KCl, 0.2 mM MgCl2, 5 mM DTT, 0.1 mM PMSF, 5 µM Leupeptin, 0,1µM Aprotinin

Puffer II

pH 7.5

5 mM Tris-HCl, 0.2 mM MgCl2, 5 mM DTT

Puffer A

pH 7.0

10 mM Na2HPO4, 10 mM NH2OH

Puffer B

pH 6.5

10 mM Na2HPO4, 2 % BSA, fettsäurefrei

Puffer C

pH 6.5

10 mM Na2HPO4

Puffer D

pH 7.5

20 mM BTP, 130 mM NaCl

Puffer E

pH 7.5

20 mM BTP, 130 mM NaCl, 10 % Saccharose

Extraktions- puffer

pH 7.0

5 mM PIPES, 1 mM EDTA, 1 mM DTT

Puffer F

pH 7.5

10 mM HEPES (pH 7.5), 1 mM Benzamidin, 20 µg/ml Leupeptin

Puffer G

pH 7.5

20 mM Tris, 100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 1 mM DTT

Puffer H

pH 7.2

10 mM PIPES, 100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 1 mM DTT

Puffer P

pH 7.0

40 mM K2HPO4, 26 mM KH2PO4, 1 mM Mg(Az)2, 0.1 mM EDTA-Na4, 1 mM DTT, 0.1 mM PMSF, 0.1 µM Aprotinin, 5 µM Leupeptin

Urea-Puffer

pH 6.5

10 mM Na2HPO4, 5 M Harnstoff


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