| Tellgmann, Gabriele: Messung der Reaktionsenthalpie von Teilreaktionen der visuellen Kaskade |
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Liste der verwendeten Chemikalien
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Nukleotide : |
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GTP |
Guanosin-5-triphosphat Trinatriumsalz Monohydrat |
(FLUKA) |
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(Reinheit laut Hersteller: ~ 97 %) |
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[das für die Messungen verwendete GTP wurde von der Arbeitsgruppe von |
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A. Wittinghofer MPI, Dortmund) über eine Q-Sepharose-Säule aufgerein]igt |
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GTPgS |
Guanosin-5-O-(3-thiotriphosphat) Tetralithiumsalz (Reinheit laut Hersteller: > 85 % [HPLC]) |
(Calbiochem) |
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GDP |
Guanosin-5-O-diphosphat Dilithiumsatz (Reinheit laut Hersteller: 80 % ) |
(BOEHRINGER) |
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ATP |
(Reinheit laut Hersteller: > 97 % ) |
(SERVA) |
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Pufferchemikalien: |
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BTP |
1, 3-Bis[tris-(hydroxymethyl)-methylamino]propan |
(FLUKA) |
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HEPES |
4-(2-Hydroxyethyl)-piperazin-1-ethansulfonsäure |
(FLUKA) |
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K2HPO4 |
di-Kaliumhydrogenphosphat, wasserfrei |
(MERCK) |
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KH2PO4 |
Kaliumdihydrogenphosphat |
(MERCK) |
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Na2HPO4 |
di-Natriumhydrogenphosphat |
(FLUKA) |
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PIPES |
Piperazin-1, 4 -bis(2-ethansulfonsäure) |
(MERCK) |
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Tris |
Tris(hydroxymethyl)-aminomethan |
(MERCK) |
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sonstige Chemikalien: |
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Aprotinin |
(Boehringer) |
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Benzamindin |
Benzamidinhydrochlorid |
(FLUKA) |
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BSA |
Bovine Albumin, fettsäurefrei |
(SIGMA) |
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DTT |
1,4-Dithio-DL-threitol |
(FLUKA) |
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EDTA |
Ethylendiamintetraessigsäure Na4-Salz · 1.5 H2O |
(SERVA) |
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Harnstoff |
(FLUKA) |
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Leupeptin |
Nr. L 2884 |
(SIGMA) |
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Mg(Az)2 |
Magnesiumacetat-Tetrahydrat |
(MERCK) |
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MgCl2 |
(FLUKA) |
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NaCl |
(FLUKA) |
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NH2OH |
Hydroxylaminhydrochlorid |
(FLUKA) |
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PMSF |
Phenylmethansulfonylfluorid |
(FLUKA) |
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Saccharose |
Saccharose zur Dichtegradientenzentrifugation |
(MERCK) |
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Verwendete Pufferlösungen
(sämtliche pH-Werte wurden bei Raumtemperatur gemessen)
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Meßpuffer |
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BTP-Puffer |
pH 7.5 |
20 mM BTP, 130 mM NaCl, 1 mM MgCl2, 1 mM DTT |
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BTP-Puffer |
pH 6.0 |
20 mM BTP, 130 mM NaCl, 1 mM MgCl2, 1 mM DTT |
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Phosphatpuffer |
pH 7.5 |
41 mM K2HPO4, 10 mM KH2PO4, 80 mM NaCl, 1 mM MgCl2, 1 mM DTT |
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Phosphatpuffer |
pH 6.0 |
6 mM K2HPO4, 50 mM KH2PO4, 100 mM NaCl, 1 mM MgCl21 mM DTT, |
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Puffer T |
pH 7.5 |
20 mM Tris, 5 mM MgCl2 |
Puffer zur Präparation
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Puffer I |
pH 7.5 |
20 mM BTP, 120 mM KCl, 0.2 mM MgCl2, 5 mM DTT, 0.1 mM PMSF, 5 µM Leupeptin, 0,1µM Aprotinin |
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Puffer II |
pH 7.5 |
5 mM Tris-HCl, 0.2 mM MgCl2, 5 mM DTT |
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Puffer A |
pH 7.0 |
10 mM Na2HPO4, 10 mM NH2OH |
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Puffer B |
pH 6.5 |
10 mM Na2HPO4, 2 % BSA, fettsäurefrei |
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Puffer C |
pH 6.5 |
10 mM Na2HPO4 |
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Puffer D |
pH 7.5 |
20 mM BTP, 130 mM NaCl |
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Puffer E |
pH 7.5 |
20 mM BTP, 130 mM NaCl, 10 % Saccharose |
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Extraktions- puffer |
pH 7.0 |
5 mM PIPES, 1 mM EDTA, 1 mM DTT |
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Puffer F |
pH 7.5 |
10 mM HEPES (pH 7.5), 1 mM Benzamidin, 20 µg/ml Leupeptin |
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Puffer G |
pH 7.5 |
20 mM Tris, 100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 1 mM DTT |
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Puffer H |
pH 7.2 |
10 mM PIPES, 100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 1 mM DTT |
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Puffer P |
pH 7.0 |
40 mM K2HPO4, 26 mM KH2PO4, 1 mM Mg(Az)2, 0.1 mM EDTA-Na4, 1 mM DTT, 0.1 mM PMSF, 0.1 µM Aprotinin, 5 µM Leupeptin |
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Urea-Puffer |
pH 6.5 |
10 mM Na2HPO4, 5 M Harnstoff |
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HTML - Version erstellt am: Fri Dec 10 15:47:58 1999 |