Aus der Klinik für Dermatologie, Venerologie und Allergologie
der Medizinischen Fakultät Charité
der Humboldt Universität zu Berlin

Dissertation

„Der Einfluß von proinflammatorischen Zytokinen und Cyclosporin A
auf die intra- und extrafollikuläre Expression von Neurotrophinen
und ihrer Rezeptoren am Haarfollikel“

zur Erlangung des akademischen Grades
Doctor medicinae (Dr. med.)

vorgelegt der Medizinischen Fakultät Charité
der Humboldt Universität zu Berlin

von

Holger Bläsing

aus: Berlin

Dekan: Prof. Dr. med. Joachim W. Dudenhausen

Gutachter:
1. Prof. Dr. med. R. Paus
2. PD Dr. rer. Nat. U. Herz
3. Prof. Dr. med. T. Zuberbier

Datum der Promotion: 28.Februar 2002

Inhaltsverzeichnis

• 1.  Zusammenfassung
• 2.  Einleitung
  • 2.1 Neurotrophine und Zytokine am Haarfollikel - Hintergrund und Stand des Wissens
  • 2.2 Haarfollikel
    • 2.2.1 Anatomie und Zyklus des Haarfollikels
    • 2.2.2 Bedeutung des Haarzyklus
    • 2.2.3  Morphogenese der Haarfollikel
  • 2.3  Neurotrophine
    • 2.3.1 Die Familie der Neurotrophine
    • 2.3.2 Die Rezeptoren der Neurotrophine
    • 2.3.3  Die Funktionen der Neurotrophine
    • 2.3.4  Neurotrophine und Haarwuchsmodulierung
  • 2.4  Zytokine
    • 2.4.1 Die Familie der Zytokine
    • 2.4.2 Funktionen der Zytokine
    • 2.4.3  Die Rezeptoren der Zytokine
    • 2.4.4  Die Zytokine IL-1β, IFN-γ und TNF-α
    • 2.4.5 Neurotrophine und Zytokine - eine Verbindung zwischen Nervensystem und Immunsystem
    • 2.4.6 Zytokine und Haarwuchsmodulierung
  • 2.5 Cyclosporin A und Dexamethason - Immunmodulatoren mit Wirkung auf Zytokine und Haarwuchs
  • 2.6 Das C57BL/6-Mausmodell
  • 2.7 Herleiten der Fragestellung
  • 2.8 Zielsetzung
  • 2.9 Untersuchungsstrategie
• 3.  Material und Methoden
  • 3.1 Tiermodell
    • 3.1.1 Die C57BL/6-Maus
    • 3.1.2 Haltung der Tiere
    • 3.1.3 Induktion von Anagen durch Depilation
  • 3.2 Zytokinapplikation
  • 3.3  Systemische CsA-Behandlung
  • 3.4 Topische Dexamethason-Gabe
  • 3.5  Verarbeitung der Haut
    • 3.5.1 Hautentnahme
    • 3.5.2  Herstellen der Kryostatschnitte
  • 3.6  Neurotrophine - Immunhistochemie
    • 3.6.1 Beschreibung der verwendeten Färbemethoden
    • 3.6.2 Durchführung der Immunfluoreszenz
    • 3.6.3  Durchführung der ABC-Färbung
  • 3.7 Auswertung der Präparate
• 4.  Ergebnisse
  • 4.1 In der Kontrollgruppe zeigten sich für jedes Neurotrophin spezifische Färbemuster
  • 4.2 Verschiedene Zytokine regulieren NGF in ÄWS und HM hoch
  • 4.3 Der Zytokincocktail reguliert p75 NTR in der DP hoch
  • 4.4 Der Zytokincocktail reguliert NT-3 und NT-4 in der Epidermis hoch
  • 4.5 Der Zytokincocktail reguliert NT-4 in Zellen von ÄWS und HM hoch
  • 4.6 CsA erhöht die NGF-Expression in ÄWS und HM
  • 4.7  Dexamethason bewirkt keine Veränderungen des NT-Musters
• 5.  Diskussion
  • 5.1 Modellbetrachtung
    • 5.1.1 Fragestellung und Methodik
    • 5.1.2 Mögliche Schlußfolgerungen
    • 5.1.3 Grenzen und Mängel des Modells
  • 5.2 Zusammenfassung der Ergebnisse
  • 5.3 Interpretation der Resultate
    • 5.3.1 NGF
    • 5.3.2 P75 NTR
    • 5.3.3 NT-3
    • 5.3.4 NT-4
    • 5.3.5 Cyclosporin A
    • 5.3.6 Dexamethason
  • 5.4  Andere Interaktionen von Neurotrophinen und Zytokinen in der Haut
  • 5.5  Bedeutung für die Haarforschung
  • 5.6 Bedeutung für die Pathophysiologie der Haut
  • 5.7 Asymmetrische Verteilung von NGF in der Haarmatrix
  • 5.8 Ausblick
• Literaturverzeichnis
• Verzeichnis der häufiger verwendeten Abkürzungen:
• Danksagung
• Lebenslauf
• Eidesstattliche Erklärung

Tabellen

• Tabelle 1: Modulatoren des humanen Haarzyklus
• Tabelle 2: Einteilung der Zytokine nach ihrer Funktion
• Tabelle 3: Färbemuster der Neurotrophine bzw. ihrer Rezeptoren in Anagen-VI-Haarfollikeln der Kontrollgruppe
• Tabelle 4: Änderungen der Immunreaktivität in murinen Anagen-VI-Haarfollikeln nach Behandlung mit Zytokinen (intradermal), CsA (intraperitoneal) oder Dexamethason (topisch) im Vergleich zu den mit Trägerstoff behandelten Kontrolltieren

Bilder

• Abbildung 1: Einteilung des HaarfollikelsDer Follikel wird in einen permanenten und einen transienten Anteil eingeteilt. Letzterer besteht aus der keratogenen Zone, der Zone von Zellwachstum und Differenzierung sowie der Matrix.
• Abbildung 2: Querschnitte durch Haarschaft und Haarfollikela Querschnitt durch den außerhalb der Haut liegenden Haarschaft eines menschlichen Terminalhaares, b Querschnitt durch einen proximalen Anagenfollikel
• Abbildung 3: Anatomie des Haarfollikels
• Abbildung 4: Strategien für die Behandlung und Prävention häufiger Haarerkrankungen
• Abbildung 5: Entwicklung und Zyklus des Haarfollikels
• Abbildung 6: Die Mitglieder der Neurotrophinfamilie und ihre Rezeptoren
• Abbildung 7: Schematische Darstellung der Neurotrophinrezeptoren
• Abbildung 8 : Schematische Darstellung der Innervation des murinen Haarfollikels während des Telogens
• Abbildung 9: Darstellung der verschiedenen Formen der Hämatopoese / Zytokin-Rezeptorfamilie
• Abbildung 10: Schematische Darstellung der Interaktionen zwischen den betrachteten Systemen
• Abbildung 11: Applikation der Zytokine
• Abbildung 12: Applikation von CsA
• Abbildung 13: Applikation von Dexamethason
• Abbildung 14: Darstellung der NGF-Immunreaktivität in HM und ÄWS
• Abbildung 15: Darstellung der p75 NTR-Immunreaktivität in der dermalen Papille
• Abbildung 16: Schematische Darstellung der Lokalisation der NGF-IR unter Verwendung von Immunfluoreszenz im murinen Haarfollikel
• Abbildung 17: Darstellung der NT-3- und NT-4-Immunreaktivität in der Epidermis
• Abbildung 18: Darstellung der NT-4-Immunreaktivität in HM und ÄWS
• Abbildung 19: Quantifizierung der NT-4-positiven Zellen in proximaler ÄWS und HM
• Abbildung 20: Schematische Darstellung der Änderungen der Immunreaktivität in murinen Anagen-VI-Haarfolikeln für NGF und NT-4
• Abbildung 21: Schematische Darstellung der Änderungen der Immunreaktivität in murinen Anagen-VI-Haarfolikeln für NT-3 und p75 NTR