(R,S)-N-Methyl-4-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat (1)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [ 3].

C₂₂H₂₇NO₅

M _r = 385,4 g/mol

F _P:

108 – 110 °C (Diethylether)

HPLC:

R _T = 10,7 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,46

FM II: R _F = 0,85

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺385 (2), 243 (32), 165 (5), 137 (3), 105 (100), 99 (34), 98 (18), 97 (5), 96 (12), 77 (16)

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,66 und 1,81 (4H, CH₂); 2,11 (3H, N-CH₃); 2,15 und 2,25 (4H, N-CH₂); 3,74 und 3,81 (je 3H, OCH₃); 4,27 (1H, OH); 4,91 (1H, CH); 6,75 (1H, Ar-H, C-5); 6,89 und 6,93 (2H, Ar-H, C-2, C-6); 7,20 - 7,37 (5H, Ar-H)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 30,4 (CH₂); 46,1 (N-CH₃); 52,1 (N-CH₂); 55,8 und 55,9 (OCH₃); 80,7 (C^*); 84,5 (CH); 110,2 (Ar-C-5); 110,7 (Ar-C-2); 119,9 (Ar-C-6); 127,4 (2 Ar-m-C); 127,9 (2 Ar-C); 128,0 (Ar-o-C); 128,0 (Ar-p-C); 134,4 (Ar-C); 142,2 (Ar-C-1); 148,5 (Ar-C-4); 148,7 (Ar-C-3); 174,0 (C=O)

(R,S)-N-Methyl-4-piperidyl 4-hydroxy-3-methoxybenzilat (5)

Die Substanz erschien als Abbauprodukt bei Stabilitätsuntersuchungen und wurde von Vorwerk strukturaufgeklärt [ 3].

C₂₁H₂₅NO₅

M _r = 371,4 g/mol

HPLC:

R _T = 6,5 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,44

FM II: R _F = 0,75

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange), D (dunkelrot)

EI-MS:

m/z (I_rel. in %): M⁺371 (1), 229 (37), 151 (9), 123 (3), 105 (100), 99 (27), 98 (18), 97 (4), 96 (14), 77 (19)

(R,S)-4-Piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat (8)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [3].

C₂₁H₂₅NO₅

M _r = 371,4 g/mol

F _P:

160 °C (Chloroform/Diethylether)

HPLC:

R _T = 10,0 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,41

FM II: R _F = 0,66

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺371 (2), 243 (54), 165 (6), 137 (1), 105 (100), 85 (23), 84 (12), 83 (1), 82 (6), 77 (21)

NMR:

s. [ 3, 4]

(R,S)-N-Methyl-4-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat N-oxid (12) (beide Isomere)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [ 4].

C₂₂H₂₇NO₆

M _r = 401,4 g/mol

HPLC:

R _T = 11,7 und 12,1 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,20 und 0,36

FM II: R _F = 0,25 und 0,36

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): kein M⁺ , 385 (1), 243 (26), 165 (30), 137 (4), 105 (100), 99 (23), 98 (14), 97 (3), 96 (10), 77 (36)

NMR:

s. [ 4]

(R,S)-N-Methyl-2-oxo-4-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat (13)

0,60 g Kaliumpermanganat und 0,50 g Natriumcarbonat werden unter Eiskühlung in
30 ml Wasser gerührt. Dazu werden 0,50 g 1-HCl gegeben und bis zum Verschwinden der Violettfärbung gerührt. Der Braunstein wird abfiltriert und die Lösung dreimal mit je 20 ml Ether extrahiert. Die Etherphase wird darauf dreimal mit je 20 ml 2 % Salzsäure ausgeschüttelt und im Vakuum eingeengt.

Ausbeute:

3 % (der Theorie)

C₂₂H₂₅NO₆

M _r = 399,4 g/mol

gelbes Öl

HPLC:

R _T = 7,1 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,50

FM II: R _F = 0,80

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 399 (1), 243 (27), 165 (30), 137 (11), 113 (13); 105 (100), 77 (51), 55 (10), 51 (15), 44 (17)

GC-MS:

R _T = 17,2 min

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,92 (2H, N-CO-CH₂); 2,44 und 2,63 (2H, N-CH₂-CH₂); 2,74 (3H, N-CH₃); 3,00 und 3,39 (2H, N-CH₂), 3,72 und 3,81 (je 3H, OCH₃); 5,25 (1H, CH); 5,84 (1H, OH); 6,76 (1H, Ar-H, C-5); 6,87 und 6,91 (2H, Ar-H, C-2, C-6); 7,20 - 7,33 (5H, Ar-H)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 26,7 (N-CH₂-CH₂); 34,3 (N-CH₃); 36,9 (N-CH₂); 44,70 (N-CO-CH₂), 55,9 (OCH₃); 70,1 (CH); 80,7 (C^∗); 110,2 (Ar-C-5); 110,7 (Ar-C-2); 119,9 (Ar-C-6); 127,1 (2 Ar-m-C); 127,1 (2 Ar-o-C); 128,3 (Ar-p-C); 133,9 (Ar-C); 141,8 (Ar-C-1); 148,8 (Ar-C-4); 148,9 (Ar-C-3); 166,4 (N-C=O); 173,8 (C=O)

(R,S)-3,4-Dimethoxybenzilsäure (16)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [3].

C₁₆H₁₆O₅

M _r = 288,3 g/mol

F _P:

92-96 °C (Wasser)

HPLC:

R _T = 9,5 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,22

FM II: R _F = 0,20

FM III: R _F = 0,32

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺288 (3), 243 (17), 165 (7), 137 (1), 105 (100), 77 (26)

NMR:

s. [3, 4]

3,4-Dimethoxybenzophenon (20)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten nach [ 98] in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [4].

C₁₅H₁₄O₃

M _r = 242,3 g/mol

F _P:

98-101 °C (Wasser-Ethanol-Gemisch)

HPLC:

R _T = 16,2 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,75

FM II: R _F = 0,90

FM III: R _F = 0,95

Detektion: A, B (gelb)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺242 (25), 165 (100), 137 (14), 105 (55), 77 (73)

NMR:

s. [3, 4]

4-Hydroxy-3-methoxybenzophenon (21)

Die biomimetische Synthese und Strukturaufklärung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [4].

C₁₄H₁₂O₃

M _r = 228,2 g/mol

HPLC:

R _T = 14,4 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,55

FM II: R _F = 0,47

FM III: R _F = 0,42

Detektion: A, B (gelb), D (blaugrün)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 228 (29), 151 (100), 123 (37), 105 (27), 77 (42)

NMR:

s. [4]

(R,S)-Methyl 3,4-dimethoxybenzilat (35)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [3].

C₁₇H₁₈O₅

M _r = 302,3 g/mol

F _P:

88-90 °C (Ethanol/Wasser)

HPLC:

R _T = 14,4 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,86

FM II: R _F = 0,92

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺302 (4), 243 (17), 165 (7), 137 (2), 105 (100), 77 (28)

NMR:

s. [3]

Nicht nachgewiesen:

3-Hydroxy-4-methoxybenzophenon

Die biomimetische Synthese und Strukturaufklärung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [ 4].

C₁₄H₁₂O₃

M _r = 228,2 g/mol

HPLC:

R _T = 14,4 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,55

FM II: R _F = 0,77

FM III: R _F = 0,42

Detektion: A, B (gelb), D (dunkelrot)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺228 (25), 151 (100), 123 (19), 105 (22), 77 (35)

NMR:

s. [4]

(R,S)-N-Formyl-4-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat

Die biomimetische Synthese und Strukturaufklärung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [ 4].

C₂₂H₂₅NO₆

M _r = 399,4 g/mol

HPLC:

R _T = 13,1 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,50

FM II: R _F = 0,89

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺399 (2), 243 (65), 165 (8), 137 (1), 113 (7), 105 (100), 77 (16), 55 (20), 42 (14)

GC-MS:

R _T = 17,7 min

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,63 und 1,75 (4H, CH₂); 3,16 und 3,45 (4H, N-CH₂); 3,72 und 3,81 (je 3H, OCH₃); 5,15 (1H, CH); 6,75 (1H, Ar-H, C-5); 6,87 und 6,93 (2H, Ar-H, C-2, C-6); 7,19 - 7,37 (5H, Ar-H); 7,91 (3H, N-CHO);

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 29,8/29,9 (CH₂); 31,1/31,2 (CH₂); 36,3/36,4 (N-CH₂); 42,4/42,5 (N-CH₂); 56,3 (OCH₃); 72,1 (CH); 81,2 (C^*); 110,7 (Ar-C-2); 111,1 (Ar-C-5); 120,1 (Ar-C-6); 127,7 (2 Ar-m-C); 128,5 (2 Ar-o-C); 128,7 (Ar-p-C); 134,4 (Ar-C); 142,2 (Ar-C-1); 149,1 (Ar-C-4); 149,3 (Ar-C-3); 161,0 (CHO); 174,2 (C=O)

(R,S)-N-Methyl-4-piperidyl 3,4-dihydroxybenzilat

Synthese und Analytik: s. [3]

C₂₀H₂₃NO₅

M _r = 357,4 g/mol

2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-2-phenylessigsäure

Synthese und Analytik: s. [3]

C₁₆H₁₆O₄

M _r = 272,3 g/mol

F _P:

58-62 °C (Wasser-Ethanol-Gemisch)

3,4-Dihydroxybenzophenon

Synthese und Analytik: s. [3]

C₁₃H₁₀O₃

M _r = 216,2 g/mol

F _P:

128-133 °C (Wasser-Ethanol-Gemisch)

(vgl. Kapitel 5.2.2.1)

(R,S)-N-Methyl-3-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat (2)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [ 3].

C₂₂H₂₇NO₅

M _r = 385,4 g/mol

F _P:

82 – 85 °C (Diethylether)

HPLC:

R _T = 12,2 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,76

FM II: R _F = 0,92

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 385 (1), 243 (8), 165 (6), 137 (3), 105 (65), 99 (15), 98 (25), 97 (100), 96 (12), 77 (27)

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,33 und 1,75 (2H, N-CH₂-CH₂-CH₂); 1,47 und 1,63 (2H, N-CH₂-CH₂); 2,05 - 2,20 (je 1H, N-CH₂ und O-CH-CH₂); 2,13 (3H, N-CH₃); 2,37 (1H, N-CH₂); 2,59 (1H, O-CH-CH₂); 3,74 und 3,81 (je 3H, OCH₃); 4,55 (1H, OH); 4,91 (1H, CH); 6,74 (1H, Ar-H, C-5); 6,94 und 6,98 (2H, Ar-H, C-2, C-6); 7,19 - 7,34 (5H, Ar-H)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 22,3 (N-CH₂-CH₂); 28,4 (N-CH₂-CH₂-CH₂); 46,2 (N-CH₃); 55,1 (N-CH₂); 55,79 und 55,84 (OCH₃); 58,6 (O-CH-CH₂); 72,1 (CH); 80,7 (C^∗); 110,2 (Ar-C-5); 110,7 (Ar-C-2); 119,7 (Ar-C-6); 127,3 (2 Ar-m-C); 127,9 (2 Ar-o-C); 128,0 (Ar-p-C); 134,5 (Ar-C); 142,4 (Ar-C-1); 148,5 (Ar-C-4); 148,7 (Ar-C-3); 173,7 (C=O)

(R,S)-3-Piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat (28)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [ 4].

C₂₁H₂₅NO₅

M _r = 371,4 g/mol

HPLC:

R _T = 11,6 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,56

FM II: R _F = 0,62

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺371 (<1), 243 (9), 165 (7), 137 (1), 105 (100), 85 (22), 84 (13), 83 (18), 82 (7), 77 (37)

NMR:

s. [4]

(R,S)-N-Methyl-6-oxo-3-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat (32)

0,98 g Quecksilber-(II)-acetat und 1,15 g Na-ED werden unter Rühren in 30 ml 1 % Essigsäure gelöst. Unter Einleiten von Stickstoff werden zu dieser heißen Lösung 0,42 g 2-HCl gegeben und 60 min unter Sieden erhitzt. Nach kurzer Zeit färbt sich die Lösung gelb und metallisches Quecksilber scheidet sich ab. Nach Abkühlen wird die Lösung filtriert, mit Natronlauge alkalisiert und dreimal mit je 25 ml Ether extrahiert. Die Etherphase wird darauf dreimal mit je 25 ml 2 % Salzsäure ausgeschüttelt, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt.

Ausbeute:

33 % d. Th.

C₂₂H₂₅NO₆

M _r = 399,4 g/mol

gelbes Öl

HPLC:

R _T = 10,3 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,58

FM II: R _F = 0,78

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 399 (1), 243 (13), 165 (6), 137 (1), 113 (50) 105 (100), 98 (7), 77 (25), 55 (12), 44 (6), 42 (5)

GC-MS:

R _T = 16,5 min

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,92 – 1,94 (2H, N-CO-CH₂); 2,16 – 2,26 (2H, N-CO-CH₂-CH₂); 2,73 (3H, N-CH₃); 3,14 - 3,18 und 3,42 - 3,46 (2H, N-CH₂); 3,71 und 3,79 (je 3H, OCH₃); 5,24 (1H, CH); 5,76 (1H, OH); 6,74 (1H, Ar-H, C-5); 6,81 - 6,83 (1H, Ar-H, C-6); 6,90 – 6,95 (1H, Ar-H, C-2); 7,20 - 7,30 (5H, Ar-H)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 25,1 (N-CO-CH₂); 27,0 (N-CO-CH₂-CH₂); 34,3 (N-CH₃); 52,6 (N-CH₂); 55,7 (OCH₃); 68,3 (CH); 80,8 (C^∗); 110,2 (Ar-C-5); 110,4 (Ar-C-2); 119,7 (Ar-C-6); 126,9 (2 Ar-m-C); 128,0 (2 Ar-o-C); 128,0 (Ar-p-C); 133,7 (Ar-C-1); 141,5 (Ar-C); 148,5 (Ar-C-4); 148,7 (Ar-C-3); 168,7 (N-C=O); 173,7 (C=O)

Nicht nachgewiesen:

(R,S)-N-Methyl-3-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat N-oxid (beide Isomere)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [4].

C₂₂H₂₇NO₆

M _r = 401,4 g/mol

HPLC:

R _T = 12,3 und 12,7 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,18 und 0,21

FM II: R _F = 0,25 und 0,32

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): kein M⁺, 385 (<1), 243 (12), 165 (31), 137 (4), 105 (100), 99 (11), 98 (11), 97 (58), 96 (7), 77 (41)

NMR:

s. [4]

(R,S)-N-Formyl-3-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat

Die biomimetische Synthese und Strukturaufklärung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [4].

C₂₂H₂₅NO₆

M _r = 399,4 g/mol

HPLC:

R _T = 12,9 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,80

FM II: R _F = 0,95

Detektion: A, B (Raumtemperatur braun, Heizplatte hellblau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 399 (1), 243 (22), 165 (5), 137 (1), 113 (28), 105 (100), 77 (23)

(R,S)-Methyl 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-2-phenylacetat

10 mmol 3,4-Dimethoxydiphenylessigsäure und 20 mmol Natriumhydrogencarbonat werden in einem 50 ml-Rundkolben in 15 ml Dimethylformamid suspendiert. Die Mischung wird nach Zugabe von 45 mmol Dimethylsulfat 10 min bei Raumtemperatur und dann 10 min auf dem Wasserbad bei 80 - 90 °C gerührt. Anschließend wird das Reaktionsgemisch in 200 ml Wasser aufgenommen und nach dem Erkalten dreimal mit Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt.

Ausbeute:

69 % d. Th.

C₁₇H₁₈O₄

M _r = 286,3 g/mol

HPLC:

R _T = 17,2 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,87

FM II: R _F = 0,91

Detektion: A, B (Raumtemperatur gelblich, Heizplatte altrosa)

IR:

[cm^-1]:1514, 1591 (C=C), 1737 (C=O), 2837 (OCH₃)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 286 (13), 227 (100), 196 (17), 183 (9), 181 (16), 153 (14), 152 (17), 115 (24)

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 3,65 (3H, CH₃); 3,74 und 3,76 (je 3H, OCH₃); 4,90 (1H, CH); 6,71 (1H, Ar-H, C-5); 6,74 und 6,77 (2H, Ar-H, C-2, C-6); 7,22 (5H, Ar-H)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 52,1 (CH₃); 55,7 (OCH₃); 56,3 (CH); 110,9 (Ar-C-5); 111,7 (Ar-C-2); 120,7 (Ar-C-6); 127,1 (2 Ar-m-C); 128,2 (2 Ar-o-C); 128,4 (Ar-p-C); 130,8 (Ar-C); 138,7 (Ar-C-1); 148,1 (Ar-C-4); 148,8(Ar-C-3); 173,0 (C=O)

(R,S)-N-Methyl-3-piperidyl 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-2-phenylacetat

In einen Rundkolben werden 10 mmol (R,S)-Methyl 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-2-phenylacetat und 11,7 mmol N-Methyl-3-piperidinol in 70 ml Petroleumbenzin vorgelegt. Zur Entfernung von Wasserspuren werden 20 ml Lösungsmittel abdestilliert und anschließend 0,4 ml einer frisch bereiteten 10 %igen methanolischen Natriummethanolatlösung zugetropft. Die Destillationsgeschwindigkeit wird so eingestellt, dass innerhalb von 5 h das Petroleumbenzin sowie vorhandenes und entstandenes Methanol abgetrieben wird, wobei nach 3 h noch einmal eine Zugabe von Natriummethanolatlösung erfolgt.

Der Rückstand wird in 50 ml Chloroform aufgenommen und dreimal mit 10 %iger Weinsäure extrahiert. Die Weinsäurephasen werden vereinigt, mit 4 M Natriumhydroxid vorsichtig alkalisiert und sofort dreimal mit Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet, im Vakuum eingeengt und umkristallisiert.

Ausbeute:

82 % d. Th.

C₂₂H₂₇NO₄

M _r = 369,4 g/mol

F _P:

73 – 75 °C (Diethylether)

HPLC:

R _T = 14,3 min (Methode I)

DC:

FM I: R _F = 0,80

FM II: R _F = 0,94

Detektion: A, B (Raumtemperatur rosé, Heizplatte braun), C (orange)

IR:

[cm^-1]:1515, 1591 (C=C), 1732 (C=O), 2786 (N-CH₃), 2836 (OCH₃), 2941 (CH₂)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺369 (1), 227 (8), 196 (3), 183 (3), 181 (3), 153 (3), 152 (4), 115 (4), 99 (1), 98 (13), 97 (100), 96 (14)

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,35 und 1,69 (2H, N-CH₂-CH₂-CH₂); 1,50 und 1,63 (2H, N-CH₂-CH₂); 2,07 und 2,11 (je 1H, N-CH₂ und O-CH-CH₂); 2,16 (3H, N-CH₃); 2,35 (1H, N-CH₂); 2,59 (1H, O-CH-CH₂); 3,74 und 3,76 (je 3H, OCH₃); 4,91 (1H, CH); 6,73 (1H, Ar-H, C-5); 6,77 und 6,80 (2H, Ar-H, C-2, C-6); 7,15-7,23 (5H, Ar-H)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 22,4 (N-CH₂-CH₂); 28,5 (N-CH₂-CH₂-CH₂); 46,2 (N-CH₃); 55,1 (N-CH₂); 55,7 (OCH₃); 56,3 (CH); 58,9 (O-CH-CH₂); 70,1 (C^∗); 110,9 (Ar-C-5); 111,7 (Ar-C-2); 120,7 (Ar-C-6); 127,0 (2 Ar-m-C); 128,2 (2 Ar-o-C); 128,4 (Ar-p-C); 131,1 (Ar-C); 138,9 (Ar-C-1); 148,1 (Ar-C-4); 148,8 (Ar-C-3); 171,9 (C=O)

N-Methyl-4-piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat (3)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [3].

C₂₂H₂₇NO₅

M _r = 385,4 g/mol

F _P:

118 – 120 °C (Chloroform/Diethylether)

HPLC:

R _T = 13,6 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,54

FM II: R _F = 0,89

FM III: R _F = 0,88

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺385 (3), 243 (24), 135 (100), 107 (27), 99 (59), 98 (70), 97 (17), 96 (68), 92 (15), 77 (16)

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,64 und 1,79 (4H, CH₂); 2,08 (3H, N-CH₃); 2,15 - 2,25 (4H, N-CH₂); 3,68 (je 3H, OCH₃); 4,51 (1H, OH); 4,89 (1H, CH); 6,76 (2H, Ar-H, C-4, C-4‘); 6,94 (2H, Ar-H, C-6, C-6‘); 6,95 (2H, Ar-H, C-2, C-2‘); 7,16 (2H, Ar-H, C-5, C-5‘)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 30,3 (CH₂); 46,0 (N-CH₃); 52,0 (N-CH₂); 55,2 (OCH₃); 72,2 (CH); 80,7 (C^∗); 113,3 (Ar-C-2, Ar-C-2‘); 113,4 (Ar-C-4, Ar-C-4‘); 119,9 (Ar-C-6, Ar-C-6‘); 128,9 (Ar-C-5, Ar-C-5‘); 143,6 (Ar-C-1, Ar-C-1‘); 159,3 (Ar-C-3, Ar-C-3‘); 173,6 (C=O)

4-Piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat (42)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [ 4].

C₂₁H₂₅NO₅

M _r = 371,4 g/mol

F _P:

152-154 °C (Chloroform/Diethylether)

HPLC:

R _T = 8,6 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,21

FM II: R _F = 0,26

FM III: R _F = 0,38

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺371 (1), 243 (32), 135 (100), 107 (35), 92 (19), 85 (65), 84 (55), 83 (12), 82 (35), 77 (21)

NMR:

s. [4]

(R,S)-N-Methyl-2-oxo-4-piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat (45)

Synthese:

s. Vergleichssubstanz (13), Rührtemperatur 5 – 10 °C

Ausbeute:

2 % d. Th.

C₂₂H₂₅NO₆

M _r = 399,4 g/mol

gelbes Öl

HPLC:

R _T = 8,5 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,58

FM II: R _F = 0,78

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺399 (1), 243 (15), 135 (100), 113 (73); 107 (20), 92 (11), 77 (17), 55 (18), 44 (11)

GC-MS:

R _T = 17,2 min

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,95 (2H, N-CO-CH₂); 2,48 - 2,66 (2H, N-CH₂-CH₂); 2,76 (3H, N-CH₃); 3,01 und 3,59 (2H, N-CH₂), 3,69 und 3,70 (je 3H, OCH₃); 5,25 (1H, CH); 6,80 (2H, Ar-H, C-4, C-4‘); 6,88 (2H, Ar-H, C-6, C-6‘); 6,94 (2H, Ar-H, C-2, C-2‘); 7,19 (2H, Ar-H, C-5, C-5‘)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 26,7 (CH₂); 34,4 (N-CH₃); 36,8 (N-CH₂); 44,8 (N-CO-CH₂), 55,3 (OCH₃); 70,2 (CH); 80,8 (C^∗); 113,2 (Ar-C-2, Ar-C-2‘); 113,6 (Ar-C-4, Ar-C-4‘); 119,8 (Ar-C-6, Ar-C-6‘); 129,3 (Ar-C-5, Ar-C-5‘); 141,5 (Ar-C-1, Ar-C-1‘); 159,5 (Ar-C-3, Ar-C-3‘); 169,9 (N-C=O), 176,8 (C=O)

3,3‘-Dimethoxybenzilsäure (46)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [3].

C₁₆H₁₆O₅

M _r = 288,3 g/mol

F _P:

105-106 °C (Ethanol)

HPLC:

R _T = 3,4 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,23

FM II: R _F = 0,28

FM III: R _F = 0,36

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺288 (3), 243 (17), 135 (100), 107 (30), 92 (18), 77 (26)

NMR:

s. [3, 4]

3,3‘-Dimethoxybenzophenon (51)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [4].

C₁₅H₁₄O₃

M _r = 242,3 g/mol

HPLC:

R _T = 11,3 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,91

FM II: R _F = 0,94

FM III: R _F = 0,90

Detektion: A, B (gelb)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 242 (15), 135 (100), 107 (37), 92 (32), 77 (49)

NMR:

s. [4]

Methyl 3,3‘-dimethoxybenzilat (68)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [3].

C₁₇H₁₈O₅

M _r = 302,3 g/mol

F _P:

69-70 °C (Methanol/Wasser)

HPLC:

R _T = 10,0 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,80

FM II: R _F = 0,91

FM III: R _F = 0,92

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 302 (1), 243 (22), 135 (100), 107 (29), 92 (15), 77 (23)

NMR:

s. [3]

Nicht nachgewiesen:

(R,S)-N-Formyl-4-piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat

Die biomimetische Synthese und Strukturaufklärung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [4].

C₂₂H₂₅NO₆

M _r = 399,4 g/mol

HPLC:

R _T = 9,0 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,60

FM II: R _F = 0,92

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺ 399 (1), 243 (16), 135 (100), 113 (55), 107 (32), 92 (15), 77 (24), 55 (17), 42 (12)

GC-MS:

R _T = 18,1 min

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,7 (4H, CH₂); 3,14 und 3,48 (4H, N-CH₂); 3,71 (je 6H, OCH₃); 4,2 (1H, OH); 5,2 (1H, CH); 6,79 (2H, Ar-H, C-4, C-4‘); 6,90 (2H, Ar-H, C-6, C-6‘); 6,93 (2H, Ar-H, C-2, C-2‘); 7,2 (2H, Ar-H, C-5, C-5‘); 7,9 (3H, N-CHO);

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 29,3 (CH₂); 30,7 (CH₂); 35,8 (N-CH₂); 42,0 (N-CH₂); 55,2 (OCH₃); 71,8 (CH); 80,8 (C^*); 113,3 (Ar-C-2, Ar-C-2‘); 113,4 (Ar-C-4, Ar-C-4‘); 119,7 (Ar-C-6, Ar-C-6‘); 129,1 (Ar-C-5, Ar-C-5‘); 143,1 (Ar-C-1, Ar-C-1‘); 159,3 (Ar-C-3, Ar-C-3‘); 159,4 (CHO); 173,5 (C=O)

(R,S)-N-Methyl-4-piperidyl 3,4-dimethoxybenzilat N-oxid (beide Isomere)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [4].

C₂₂H₂₇NO₆

M _r = 401,4 g/mol

HPLC:

R _T = 8,3 und 8,5 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,23 und 0,35

FM II: R _F = 0,30 und 0,37

FM III: R _F = 0,48 und 0,62

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): kein M⁺, 243 (14), 135 (100), 107 (36), 99 (16), 98 (21), 97 (5), 96 (23), 92 (25), 77 (36)

NMR:

s. [4]

(vgl. Kapitel 5.2.2.3)

(R,S)-N-Methyl-3-piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat (4)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB [3].

C₂₂H₂₇NO₅

M _r = 385,4 g/mol

F _P:

66-70 °C (Methanol/Wasser)

HPLC:

R _T = 11,5 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,74

FM II: R _F = 0,89

FM III: R _F = 0,89

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺385 (<1), 243 (5), 135 (24), 107 (12), 99 (4), 98 (14), 97 (100), 96 (13), 92 (12), 77 (8)

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,34 und 1,75 (2H, N-CH₂-CH₂-CH₂); 1,49 und 1,61 (2H, N-CH₂-CH₂); 2,10 - 2,20 (je 1H, N-CH₂ und O-CH-CH₂); 2,11 (3H, N-CH₃); 2,54 - 2,59 (je 1H, O-CH-CH₂ und N-CH₂); 3,67/3,68 (je 3H, OCH₃); 4,92 (1H, CH); 6,75 (2H, Ar-H, C-4, C-4‘); 6,91 - 6,99 (4H, Ar-H, C-2, C-2‘, C-6, C-6‘); 7,15 (2H, Ar-H, C-5, C-5‘)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 22,2 (N-CH₂-CH₂); 28,4 (N-CH₂-CH₂-CH₂); 46,0 (N-CH₃); 55,0 (N-CH₂); 55,2 (OCH₃); 58,5 (O-CH-CH₂); 72,0 (CH); 80,8 (C^∗); 113,0 (Ar-C-2, Ar-C-2‘); 113,4 (Ar-C-4, Ar-C-4‘); 119,8 (Ar-C-6, Ar-C-6‘); 128,8 (Ar-C-5, Ar-C-5‘); 143,6 (Ar-C-1, Ar-C-1‘); 159,3 (Ar-C-3, Ar-C-3‘); 173,3 (C=O)

(R,S)-3-Piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat (60)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB.

C₂₁H₂₅NO₅

M _r = 371,4 g/mol

HPLC:

R _T = 9,4 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,55

FM II: R _F = 0,82

FM III: R _F = 0,88

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺371 (<1), 243 (4), 135 (27), 107 (11), 92 (12), 85 (9), 84 (16), 83 (100), 82 (16)

Nicht nachgewiesen:

(R,S)-N-Methyl-3-piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat N-oxid (beide Isomere)

Die Synthese und Struktursicherung erfolgten in der Arbeitsgruppe Pharmazeutische Chemie (Prof. Dr. Göber) am Institut für Pharmazie der HUB.

C₂₂H₂₇NO₆

M _r = 401,4 g/mol

HPLC:

R _T = 8,2 und 8,6 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,22 und 0,33

FM II: R _F = 0,25 und 0,32

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

N-Methyl-6-oxo-3-piperidyl 3,3‘-dimethoxybenzilat

Synthese:

s. Vergleichssubstanz 32

Ausbeute:

13 % (der Theorie)

C₂₂H₂₅NO₆

M _r = 399,4 g/mol

gelbes Öl

HPLC:

R _T = 8,2 min (Methode II)

DC:

FM I: R _F = 0,54

FM II: R _F = 0,79

Detektion: A, B (Raumtemperatur grün, Heizplatte grau), C (orange)

EI-MS:

m/z (I _rel. in %): M⁺399 (>1), 243 (11), 135 (100), 113 (70); 107 (34), 98 (7), 92 (14), 77 (25), 55 (10), 42 (8)

GC-MS:

R _T = 18,0 min

¹ H-NMR:

δ [ppm]: 1,95 (2H, N-CO-CH₂); 2,16 - 2,30 (2H, N-CO-CH₂-CH₂); 2,77 (3H, N-CH₃); 3,23 und 3,46 (2H, N-CH₂); 3,69 (je 3H, OCH₃); 5,26 (1H, CH); 6,77-6,80 (2H, Ar-H, C-4, C-4‘); 6,86-6,93 (4H, Ar-H, C-2, C-2‘, C-6, C-6‘); 7,15 - 7,20 (2H, Ar-H, C-5, C-5‘)

¹³ C-NMR:

δ [ppm]: 25,1 (N-CO-CH₂); 27,0 (N-CO-CH₂-CH₂); 34,6 (N-CH₃); 52,9 (N-CH₂); 55,2 (OCH₃); 68,6 (CH); 80,9 (C^∗); 113,3 (Ar-C-2, Ar-C-2‘); 113,5 (Ar-C-4, Ar-C-4‘); 119,5 (Ar-C-6, Ar-C-6‘); 129,1 (Ar-C-5, Ar-C-5‘); 142,8 (Ar-C-1, Ar-C-1‘); 159,4 (Ar-C-3, Ar-C-3‘); 168,9 (N-C=O); 173,3 (C=O)

Drei Methoden wurden in ihrer Eignung zur Reinigung des biologischen Materials überprüft. Zur Bestimmung der Wiederfindung wurden 100 mg von 1, 2, 3 und 4 in 25 ml Eigenurin gelöst. 2,5 ml dieser Lösung wurden zu 25,0 ml Urin aufgefüllt.

Die Harn- und Kotproben wurden nach Lyophylisation viermal erschöpfend mit 30 °C warmen Methanol extrahiert. Dabei entsprach die Menge Lösungsmittel dem ursprünglichen Probengewicht vor der Gefriertrocknung. Die Filtrate wurden eingeengt und mit Wasser so aufgefüllt, dass ein Drittel der früheren Menge an Urin oder Kot erreicht wurde. Je 20 ml Konzentrat wurden 0,5 g Ammoniumchlorid zugesetzt und mit verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von 2 eingestellt. Diese Lösung wurde auf eine Extrelut^® 20-Säule aufgebracht und nach 15minütigem Einziehen mit 40 ml Essigsäueethylester eluiert. Auf der Säule verbliebenes Elutionsmittel konnte durch Absaugen gewonnen werden. Durch anschließendes Einengen und Aufnahme in Methanol ist die Fraktion der unkonjugierten Säuren und Neutralstoffe erhalten worden. Mit einer Pumpe wurde Ammoniakdampf durch die Säulen gezogen. Das Ende der Äquilibration konnte aufgrund der basischen Reaktion einer Phenolphthaleinlösung, die hinter die Säule geschaltet war, indiziert werden. Nach Elution mit 40 ml Dichlormethan/Isopropanol (85:15) wurde die Fraktion der basischen unkonjugierten Metaboliten erhalten. Das ursprüngliche Urinkonzentrat konnte durch Aufgabe von 40 ml gesättigter Natriumchloridlösung wiedergewonnen werden, indem dieses zuerst das restliche Lösungsmittel und dann die aufgezogene wässrige Lösung verdrängte. Diese Lösung enthielt die konjugierten Metabolite. Sie wurde mit verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von 5 eingestellt, mit 80 μl des Enzymgemischs von
ß-Glucuronidase/Arylsulfatase versetzt und 24 Stunden bei 37 °C zur Konjugatspaltung inkubiert. Zu 20 ml dieser Lösung wurden 0,5 g Ammoniumchlorid gegeben und, wie oben beschrieben, weiter verfahren. Es wurden nun die Fraktionen der ursprünglich konjugierten Metabolite gewonnen.

Für die analytische DC wurden DC-Alufolien, Kieselgel 60 F₂₅₄, 20 x 20 cm (Merck) verwendet. Die Entwicklung erfolgte in Normalkammern nach 30minütiger Kammersättigung über eine Laufhöhe von 15 cm.

Fließmittelgemische:

I:

Dichlormethan/Cyclohexan/Methanol/Ammoniak – 50 : 35 : 15 : 1

II:

Dioxan/Cyclohexan/Ethylacetat/Ethanol/Ammoniak – 15 : 15 : 40 : 20 : 10

III:

Toluol/Isopropanol/Ammoniak – 30 : 60 : 10

Detektionsmittel:

A:

Fluoreszenzlöschung im UV (254 nm)

B:

konzentrierte Schwefelsäure, nach Besprühen 10 - 20 min auf der Heizplatte bei 120 °C

C:

Dragendorff-Reagenz, modifiziert [99]

D:

MBTH-Reagenz [8]

(Aufbewahren der Platte 10 min in einer mit Ammoniak gesättigten Kammer, nacheinander Besprühen mit 2 %iger methanolischer MBTH-Lösung und 8 %iger wässriger Kaliumhexacyanoferrat-(III)-Lösung)

§

außerdem: Emerson-Reagenz [ 27]

Für die präparative Schichtchromatographie wurden PSC-Fertigplatten, Kieselgel 60 F₂₅₄, 20 x 20 cm, 2 mm Schichtdicke (Merck) und DC-Alufolien, Kieselgel 60 F₂₅₄,
20 x 20 cm (Merck) verwendet. Die Entwicklung erfolgte in Normalkammern nach 30minütiger Kammersättigung über eine Laufhöhe von 16 cm. Die verwendeten Fließmittelgemische entsprachen denen der analytischen DC. Die Substanzbanden wurden detektiert, ausgekratzt oder ausgeschnitten, mit Methanol extrahiert und danach eingeengt.

Stationäre Phase:

LiChroCART^® 125-4, LiChrospher^® 60, RP-select B (5 μm) (Merck)

Detektion:

Dioden-Array-Detektor (bei 280 nm)

Injektionsvolumen:

25 μl

Methode I:

(nach Smolinka [ 4])

Mobile Phase:

Wässrige Ammoniumacetatlösung (0,05 M) wird mit 70 %iger Perchlorsäure auf einen pH-Wert von 2,3 eingestellt (Lösung A).

Lösung A / Acetonitril:

Gradient: lineare Erhöhung des Acetonitrilanteils von 20 % auf 27 % innerhalb 10 min, auf 50 % innerhalb 15 min, danach konstant 50 : 50;

Fluss: 1,2 ml/min

Methode II:

(nach Smolinka [4])

Mobile Phase:

Kaliumdihydrogenphosphatpuffer pH 7,5 /Acetonitril:

Gradient: 1 min 10 % Acetonitril, danach lineare Erhöhung des Acetonitrils auf 90 % innerhalb von 17 min;

Fluss: 1,5 ml/min

Stationäre Phase:

LiChroCART^® 250-10, LiChrosorb RP-18 (7 μm) (Merck)

Detektion:

UV-Detektor bei 280 nm

Injektionsvolumen:

100 μl

Die verwendeten mobilen Phasen entsprachen denen der analytischen HPLC.