7.1 Kommerzielle Sequenzierung (Agowa)
7.1.1 Sequenzierung des Zielgenvektors pBSK5`eYFPpAdual3`
7.1.1.1 mit dem Primer T3
| Abbildung 30: Graphische Darstellung der Sequenzierung des Zielgenvektors pBSK5`eYFPpAdual3`mit dem Primer T3 | ||
|
Rot unterlegt: Sequenz der dualen Neo/Kan- Kassette Kursiv: 3`homologe Region Fett: Sequenz des pBSK II SK (+) |
7.1.1.2 mit dem Primer T7
| Abbildung 31: Graphische Darstellung der Sequenzierung des Zielgenvektors pBSK5`eYFPpAdual3` mit dem Primer T7 | ||
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Kursiv: 5`homologe Region Gelb unterlegt: kodierende Region des eYFPs Fett: Hauptsequenz des PolyA |
7.2 Methylierungsanalyse (Epiontis)
Tabelle 17: Orginalwerte zur Methylierungsanalyse
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TGF-β Amp1 |
TGF- β /Neutral Amp1 |
|
0,29 |
1 |
|
0,51 |
1 |
|
0,57 |
1 |
|
0,435 |
1 |
|
0,67 |
1 |
|
0,595 |
1 |
|
0,845 |
1 |
|
0,885 |
1 |
|
1 |
1 |
|
0,84 |
1 |
|
0,43 |
1 |
|
0,48 |
1 |
|
Amp2 |
Amp2 |
|
0,9 |
1 |
|
1 |
1 |
|
0,795 |
1 |
|
0,46 |
1 |
|
0,62 |
1 |
|
0,44 |
1 |
|
0,485 |
1 |
|
0,45 |
1 |
7.3 Vektorkarten verwendeter Klonierungsvektoren
| Abbildung 32: Übersicht des Klonierungsvektors pBluescript II SK (2+) | ||
| MCS= multiple Klonierungsstelle; Amp= Ampicillin- Resistenzgen; LacZ= LacZ Gen (β- Galaktosidase) zur alpha- Komplementation, Nachweis rekombinierter Plasmide über blau/weiß- Selektion |
| Abbildung 33: Übersicht des Klonierungsvektor pBSK mit dualer Resistenzkassette | ||
| MCS= multiple Klonierungsstelle; neo= Neomycin; kan= Kanamycin; frt- site= Flp- Erkennungsstelle; loxP= Cre- Erkennungsstelle; pBSK= pBluescript II SK (2+) |
| Abbildung 34: Übersicht des Klonierungsvektor von Markus Mohrs | ||
| IRES= internal ribsom entry site; pGK-neo= Neomycin- Resistenzgen; eYFP= enhanced yellow fluorescenc protein; loxP= Cre- Erkennungsstelle; I2= IL-2, Interleukin 2; pA= Polyadenlierungssignal |
| Abbildung 35: Übersicht über Transfektionsvektor pMCV 1.4 eGFP | ||
| Kan= Kanamycin- Resistenzgen; MCV= Cytomegalovirus; eGFP= enhanced Green fluorscenc protein |
| Abbildung 36: Übersicht des Zielgenvektors 5`eYFPpAdual3` | ||
| pBSK= pBluescript II SK (2+); dual neo/kann= duales Neomycin- und Kanamycin- Resistenzgen; frt- site= Flp- Erkennungsstelle; 3`HR= 3`homologe region; 5`HR= 5`homologe Region; Amp= Ampicillin- Resistenzgen; eYFP= enhanced Yellow fluorescenc protein; pA= Polyadenylierungssignal |
| Abbildung 37: Übersicht des Reportevektors pRL-TK | ||
| RL= Renilla Luciferasegen; Amp= Ampicillin- Resistenzgen; HSV TK= Herpes simpex Virus Thymidinkinase Promoter |
| Abbildung 38: Übersicht über Klonierungsvektor pGL3Basic | ||
| Amp= Ampicillin- Resistenzgen; Luciferase= Luciferasegen (Photinus pyralis); pGL3Basic= Lucifearase Reporter Vektor von Promega |
| Abbildung 39: Übersicht des Reportervektors pGL3BasicTSDR | ||
| pGL3basic= Lucifearase Reporter Vektor von Promega; Amp= Ampicillin- Resistenzgen; Luciferase= Luciferasegen (Photinus pyralis); TSDR= Treg specific demethylated region |
| Abbildung 40: Übersicht des Klonierungsvektors pGL3Promoter | ||
| pGL3Promoter= Lucifearase Reporter Vektor von Promega; Amp= Ampicillin- Resistenzgen; Luciferase= Luciferasegen (Photinus pyralis); SV40 Promoter= minimaler Simian vacuolating virus 40 Promoter |
| Abbildung 41: Übersicht des Repotervektors pGL3Promoter TSDR | ||
| pGL3Promoter= Lucifearase Reporter Vektor von Promega; Amp= Ampicillin- Resistenzgen; Luciferase= Luciferasegen (Photinus pyralis); SV40 Promoter= minimaler Simian vacuolating virus 40 Promoter; TSDR= Treg specific demethylated region |
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