4.  Ergebnisse

4.1.  Mikroskopie des intakten Mesothels

Die abgebildeten Aufnahmen stammen vom Peritoneum eines Kontrolltieres und zeigen einen Normalbefund. Die peritoneale Oberfläche war von einer Schicht flacher Mesothelzellen bedeckt. Die Deckzellen besaßen einen unregelmäßigen, polygonalen Umriss und maßen im Durchmesser ca. 12-27 µm. Auf ihrer Oberfläche fand sich ein Teppich feiner Mikrovilli. Die Zellgrenzen waren als Rinnen angedeutet, an denen die Dichte der Mikrovilli zunahm. Eine genaue Bestimmung der Zellgrenzen gelang nur durch genaue Untersuchung mit hoher Vergrößerung.

	Abbildung 5: intaktes Mesothel in 200, 1000, 2000, 5000facher Vergrößerung

4.2.  Aufnahmen von Tumorzellen

Die Tumorzellen präsentierten sich zum größten Teil als Rundzellen. In den Präparaten wurden aber auch ovale oder polygonale Formen gefunden. Einige der malignen Zellen schienen gerade in Mitose befindlich. Die Oberflächenstruktur der malignen Zellen war vielgestaltig. Kurze Mikrovilli, Auffältelungen, Einbuchtungen und unterschiedliche Ausstülpungen der Zellmembran waren die unterschiedlichen morphologischen Ausprägungen der Zellmembran. Der Durchmesser betrug zwischen 5 und 8,5 µm.

	Abbildung 6: DHD/K12/12/TRb Kolonkarzinomzellen in 200, 1000, 2000 und 5000facher Vergrößerung

4.3.1.  Separation der Mesothelzellen

Dieses Biopsat wurde zwölf Stunden nach CO₂-Pneumoperitoneum gewonnen. Die Mesothelzellen behielten ihre flache, polygonale Form. Zellgrenzen waren deutlich erkennbar. Dazwischen war eindeutig die Basalmembran zu erkennen. Die Verbindung zwischen den Mesothelzellen blieb durch Interzellularbrücken aufrechterhalten. Form und Anzahl der Mikrovilli waren unbeeinträchtigt.

	Abbildung 7: Separation der Mesothelzellen in 200, 1000, 2000 und 5000facher Vergrößerung

Diese Bilderserie wurde von einem Präparat erstellt, das einer Ratte 96 Stunden nach Applikation eines CO₂-Pneumoperitoneums entnommen wurde. Die Mesothelzellen zeigten eine Retraktion des apikalen Zellpols der Mesothelzellen. Die Zellgrenzen waren gut erkennbar, jedoch war an keiner Stelle die Basalmembran freigelegt.

	Abbildung 8: Retraktion des Mesothels in 200, 1000, 2000 und 5000facher Vergrößerung

4.3.3.  Lokal begrenzte Entzündung

Wiederholt zeigten sich offensichtliche Zerstörungen des normalen Mesothelaufbaus, die durch Retraktion, Separation und Ablösung von Mesothelzellen gekennzeichnet waren, und damit das Bild einer Entzündung zeigten. Außerdem fanden sich in diesen Probenausschnitten regelmäßig Rundzellen. Diese Entzündungen waren immer streng lokal begrenzt bzw. scharf abgegrenzt. Sie dehnten sich nie auf einen ganzen Quadranten oder ein vollständiges Präparat aus. Bei Auftreten dieser Veränderung wurde der entsprechende Quadrant als „entzündlich verändert“ gewertet.

	Abbildung 9: lokale Entzündung des Peritoneums in 200, 1000, 2000 und 5000facher Vergrößerung

4.3.4.  Mechanisch verursachte Läsion des Peritoneums

In einer Probe eines Kontrolltieres konnte eine offensichtlich mechanische Läsion dokumentiert werden. Sie hatte die Form von zwei parallelen, ca. 5 mm langen und 6-8 µm breiten Streifen. Die Deckzellen waren abgelöst, die Basalmembran freigelegt. Es lagen keine Veränderungen des umliegenden Mesothels vor. Fibrinbeläge, Tumor- oder Entzündungszellen ließen sich nicht nachweisen.

	Abbildung 10: Verletzung des Mesothels in 200, 1000, 2000 und 5000facher Vergrößerung

4.3.5.  Risse in der Oberfläche

In einigen Proben war das Mesothel von Rissen durchzogen. Die Risse waren bis zu 5µm breit und 150µm lang. Die Risse folgten nicht den Zellgrenzen, sondern bildeten schluchtenartige, in die Tiefe ziehende Eröffnungen der peritonealen Oberfläche.

	Abbildung 11: Risse in 200 und 2000facher Vergrößerung

4.3.6.  Erythrozyten

Auf dem Mesothel liegende Erythrozyten waren leicht an ihrer Form und Größe zu erkennen. Sie traten einzeln oder als Zellballen auf.

	Abbildung 12: Erythrozyten in 200 und 2000facher Vergrößerung

4.3.7.  Feinkörnige Beläge

Stellenweise waren die Mesothelzellen von feinkörnigen Belägen bedeckt. Diese verklebten die Mikrovilli und erschwerten die Beurteilung des Peritoneums. Sie variierten in ihrer Dichte, nicht aber in der feinkörnigen Struktur.

	Abbildung 13: feinkörnige Beläge in 200, 1000, 2000 und 5000facher Vergrößerung

4.3.8.  Rundzellen

In einigen Präparaten wurden auf dem Mesothel Rundzellen entdeckt. Sie waren nicht regelmäßig auf dem Peritoneum verteilt, sondern traten lokal gehäuft auf. Ihre Oberfläche war von feinen Auffältelungen sowie Ein- und Ausbuchtungen geprägt. Der Durchmesser lag zwischen 4 und 7.5 µm. Deutlich erkennbar war die Adhäsion der Rundzellen an die Mikrovilli des Mesothels.

	Abbildung 14: Rundzellen in 200, 1000, 2000, 5000 (2x) und 10000facher Vergrößerung

Die folgenden Tabellen geben die Häufigkeit der Einzelbefunde an (Tabelle 3). Die Darstellung soll einen Überblick über die Verteilung der Phänomene und den Zustand bzw. die Qualität der Proben geben, daher erfolgte keine Berücksichtigung der Anzahl der betroffenen Quadranten oder der Ausprägung von Befunden.

Tabelle 3: Häufigkeit der Einzelbefunde

Das Peritoneum aller Kontrolltiere war intakt. Als Besonderheit fand sich in einem Präparat eine offensichtlich mechanisch verursachte Läsion. In zwei Proben wurden Rundzellen entdeckt.

Tabelle 4: Auswertung der Kontrolltiere

Von den 25 untersuchten Ratten konnten bei 21 Tieren keine Veränderungen des Peritoneums festgestellt werden (84 %). Viermal wurden das Peritoneum als „entzünd­lich verändert“ beurteilt (16 %); in keiner Untergruppe (zu keinem Zeitpunkt) war die Häufigkeit der entzündlich veränderten Proben größer als zwei (40 %).

Tabelle 5: Auswertung der Untergruppe CO₂/2, Biopsieentnahme nach zwei Stunden

Tabelle 6: Auswertung der Untergruppe CO₂/12, Biopsieentnahme nach zwölf Stunden

[Seite 63↓]

Tabelle 7: Auswertung der Untergruppe CO₂/24, Biopsieentnahme nach 24 Stunden

Tabelle 8: Auswertung der Untergruppe CO₂/48, Biopsieentnahme nach 48 Stunden

[Seite 64↓]

Tabelle 9: Auswertung der Untergruppe CO₂/96, Biopsieentnahme nach 96 Stunden

Von den 25 untersuchten Präparaten konnte in 21 Fällen ein intaktes Peritoneum diagnostiziert werden (84 %). Vier Mal wurde ein „entzündlich verändertes“ Mesothel diagnostiziert (16 %); in keiner Untergruppe war die Häufigkeit größer als zwei (40 %).

Tabelle 10: Auswertung der Untergruppe Helium/2, Biopsieentnahme nach zwei Stunden

[Seite 65↓]

Tabelle 11: Auswertung der Untergruppe Helium/12, Biopsieentnahme nach zwölf Stunden

Tabelle 12: Auswertung der Untergruppe Helium/24, Biopsieentnahme nach 24 Stunden

[Seite 66↓]

Tabelle 13: Auswertung der Untergruppe Helium/48, Biopsieentnahme nach 48 Stunden

Tabelle 14: Auswertung der Untergruppe Helium/96, Biopsieentnahme nach 96 Stunden

Bei jeweils 25 Tieren wurde mit CO₂ oder Helium ein Pneumoperitoneum über 15 mm Hg und 30 min aufgebaut. In beiden Gruppen wurde danach nur bei 4 Tieren ein entzündlich verändertes Mesothel beobachtet. Die Hypothesen, dass ein Pneumo­peritoneum mit den Insufflationsgasen CO₂ bzw. Helium eine morphologisch fassbare entzündliche Veränderung des Peritoneums der Ratte verursacht (1.3.3), wurden somit abgelehnt. Das Ergebnis war für beide Gruppen signifikant (P<0,05). (3.3, Tabelle 15).

Ein Unterschied zwischen der Helium- und der CO₂- Gruppe wurde nicht festgestellt.

Tabelle 15: Statistische Auswertung der Untergruppen