Einfluss von Cyclodextrinen auf die okulare Verfügbarkeit von Antiglaukomatosa und Immunsuppressiva in vitro / in vivoSigrid Knapp-UlrichI.123II.4III.5III.1.III.1.1.518#35167III.1.2.8509#1519III.1.3.1011III.1.4.12III.2.III.2.1.131415III.2.2.16171819III.2.3.202122III.3.23III.3.1.III.3.1.1.24III.3.1.2.III.3.2.25III.3.2.1.2627III.3.2.2.2829303132III.3.3.33III.3.3.1.34III.3.3.2.35III.3.4.36III.3.5.37III.4.III.4.1.III.4.1.1.3839III.4.1.2.4041424344III.4.1.3.45III.4.1.4.46III.4.1.5.III.4.1.5.1.47III.4.1.5.2.48III.4.1.5.3.III.4.1.5.4.49III.4.1.5.5.50IV.IV.1.51IV.2.52184#45364#234288#50IV.3.53IV.3.1.IV.3.1.1.IV.3.1.2.54128#39IV.3.1.3.293#22855117#41IV.3.2.56IV.4.IV.5.5758V.V.1.V.1.1.596061V.1.2.62V.1.2.1.63V.1.2.2.646566566#310V.1.2.3.676869529#26170537#265530#289V.1.2.4.7172V.1.2.5.73747576777879V.1.2.6.80V.1.2.6.1.8182567#28683V.1.2.6.2.8485517#370V.1.3.868788599#806V.1.4.8990V.2.9192V.2.1.93481#27394605#32295470#286474#27096502#287V.2.2.97V.2.3.9899V.2.4.100101102V.2.5.103V.3.104V.3.1.V.3.1.1.105106V.3.1.2.107559#274V.3.2.108V.3.2.1.109110V.3.2.2.111532#256112V.3.2.3.113V.3.2.4.114502#352115V.3.3.VI.116VI.1.117118119VI.2.VI.2.1.VI.2.1.1.VI.2.1.2.120VI.2.1.3.VI.2.1.4.VI.2.1.5.VI.2.1.6.VI.2.1.7.121117#43VI.2.1.8.VI.2.2.122123VI.2.2.1.VI.2.2.2.124VI.2.2.3.125VI.2.2.4.126VI.2.2.5.78#46127VI.2.3.VI.2.3.1.VI.2.3.2.VI.2.3.2.1.128VI.2.3.2.2.VI.2.3.2.3.129VI.2.4.130VI.2.4.1.VI.2.4.2.131409#226132290#187VI.2.4.3.133VI.2.4.4.VI.2.4.4.1.134135VI.2.4.4.2.VI.2.5.VI.2.6.136VI.2.6.1.137VI.2.6.2.138VI.2.6.3.VI.2.6.3.1.VI.2.6.3.2.VI.2.6.3.3.139VI.2.6.3.4.VI.2.7.VI.2.7.1.VI.2.7.2.140VI.2.7.3.VI.2.7.3.1.141VI.2.7.3.2.VI.2.7.3.3.VI.2.7.3.4.142VI.2.7.3.5.143VI.2.7.3.6.VI.2.8.144145VI.2.9.VI.2.9.1.146VI.2.9.2.VII.147148149150151 Literaturverzeichnis155156157158159160161162163164165166167168169170 Publikationen171172173ErklärungdeInhaltsverzeichnisHilfeEinfluss von Cyclodextrinen auf die okulare Verfügbarkeit<br/>von Antiglaukomatosa und Immunsuppressiva in vitro / in vivoD i s s e r t a t i o n
zur Erlangung des akademischen Grades
doctor rerum naturalium
(Dr. rer. nat.)
im Fach Pharmazieeingereicht an der
Mathematisch-Naturwissenschaftlichen Fakultät I
der Humboldt-Universität zu Berlinvon Apothekerin
Sigrid Ursula Knapp-Ulrich
geboren am 29.03.1973 in Tübingen

Präsident der Humboldt-Universität zu Berlin
Prof. Dr. Jürgen Mlynek

Dekan der Mathematisch-Naturwissenschaftlichen Fakultät I
Prof. Thomas Buckhout, PhD Prof. Dr. Sigrid Keipert Prof. Dr. Uwe Pleyer Tag der mündlichen Prüfung: 13.09.04 Abstract

Die Verwendung von Cyclodextrinen (CDen) als Hilfsstoffe zur topischen Anwendung in der Ophthalmologie hat in den letzten Jahren zunehmend an Bedeutung gewonnen. Hierbei steht die Verbesserung der Wasserlöslichkeit schwerlöslicher Arzneistoffe, die Modifizierung der Bioverfügbarkeit sowie die Verminderung okularer Reizungen im Vordergrund.

Diese Arbeit untersuchte die corneale In-vitro-Permeation von Betarezeptorenblockern (partiell mit Pilocarpin kombiniert) im Zusammenhang mit alpha-CD und den hydroxypropylierten (HP) alpha-, beta- bzw. gamma-CD-Derivaten. Der Zusatz von CDen führte teilweise zu einer signifikanten Veränderung der Permeationsparameter, verglichen mit denjenigen der CDfreien Lösungen.

Weiterhin wurden das schwerlösliche Prodrug Mycophenolatmofetil (MMF) und die aktive Wirksubstanz Mycophenolsäure (MPA) mit HP-beta-CD in Lösung gebracht und anschließend die Wirkstoffverteilung im Kaninchenauge in vivo bestimmt. Im Vergleich zu einer MMF-Suspension waren die MPA-Spiegel in Cornea und Kammerwasser nach 60 min für die HP-beta-CD-haltige MMF-Lösung deutlich erhöht.

Ferner wurden für die neuen, extrem schwer wasserlöslichen Selektiven Glucocorticoid-rezeptoragonisten (SEGRA) – ZK 216771 und ZK 247756 – innovative Augentropfen-formulierungen entwickelt. So wurde ZK 216771 mit Ethanol und HP-gamma-CD in Lösung gebracht und für ZK 247756 eine HP-gamma-CDhaltige Mikroemulsion entwickelt. In beiden Fällen war ein spezielles Herstellungsverfahren erforderlich. ZK 247756 konnte auf diese Weise nach Keratoplastik bei Ratten erfolgreich angewendet werden (signifikante Verlängerung der Transplantatüberlebenszeit im Vergleich zu einer unbehandelten Kontrollgruppe bzw. Vehikelgruppe).

 Okulare Verfügbarkeit Betablocker Mycophenolatmofetil Selektive Glucocorticoidrezeptoragonisten Cyclodextrine Abstract

In the past years, cyclodextrins (CDs) became more and more an important excipient for drug formulations. The main use of CDs in ophthalmic drug delivery is to increase the water solubility of lipophilic drugs, to modify drug bioavailability and to reduce ocular irritation.

In the present study, the corneal permeability of different betablockers (in part combined with pilocarpine) in the presence of alpha-CD and hydroxypropylated (HP) alpha-, beta- and
gamma-CD was examined. Addition of CDs often led to significant changes in permeation parameters, compared to CD-free solutions.

The prodrug mycophenolate mofetil and its active drug mycophenolic acid (MPA) were solubilized by HP-beta-CD. The intraocular availability of these solutions was studied in the rabbit eye in vivo in comparison to a MMF-suspension. Applying MMF/HP-beta-CD-solution, the MPA level in cornea and aqueous humour (after 60 min) turned out to be significant higher than those of the MMF-suspension.

In addition, for the extremely low soluble selective glucocorticoidreceptor agonists (SEGRA) – ZK 216771 and ZK 247756 – innovative drug formulations were developed. ZK 216771 was solubilized with ethanol and HP-gamma-CD in buffer. A microemulsion, containing also HP-gamma-CD, served as vehicle for ZK 247756. For both formulations, a special manufacturing process was required. In this way, ZK 247756 could be applied in rabbits after corneal transplantation. Topical application of this formulation was highly effective in prolonging the mean survival time of corneal grafts as compared to untreated controls or animals that received the vehicle only.

 Ocular availability Betablocker Mycophenolate mofetil Selektive Glucocorticoidreceptoragonists Cyclodextrins Inhaltsverzeichnis

  • I.  Einleitung

  • II.  Problemstellung

  • III.  Theoretische Grundlagen

    • III.1. Anatomie, Physiologie und Funktionalität des Auges

      • III.1.1. Der Augapfel

      • III.1.2. Die Tränenflüssigkeit

      • III.1.3.  Das Kammerwasser

      • III.1.4.  Die Cornea

    • III.2. Lokale Therapie in der Augenheilkunde

      • III.2.1.  Allgemeines

      • III.2.2.  Glaukom

      • III.2.3.  Immunologische Erkrankungen

    • III.3.  Arzneistoffe

      • III.3.1. Pilocarpin

        • III.3.1.1.  Eigenschaften

        • III.3.1.2.  Pharmakologie

      • III.3.2.  β-Adrenozeptor-Antagonisten

        • III.3.2.1.  Struktur und Eigenschaften

        • III.3.2.2.  Pharmakologie

      • III.3.3.  Mycophenolatmofetil (MMF) und Mycophenolsäure (MPA)

        • III.3.3.1. Eigenschaften

        • III.3.3.2. Pharmakologie

      • III.3.4.  ZK 216771

      • III.3.5.  ZK 247756

    • III.4. Hilfsstoffe / Trägersysteme

      • III.4.1. Cyclodextrine

        • III.4.1.1.  Cyclodextrine allgemein

        • III.4.1.2.  Cyclodextrine in Ophthalmika

        • III.4.1.3. Toxikologie der Cyclodextrine

        • III.4.1.4. Mikroemulsionen

        • III.4.1.5. Sonstige Hilfsstoffe

          • III.4.1.5.1.  Benzalkoniumchlorid

          • III.4.1.5.2.  Rizinusöl

          • III.4.1.5.3. Polysorbat 80 (Tween® 80)

          • III.4.1.5.4. Cremophor® RH 40

          • III.4.1.5.5. Macrogol 300/400

  • IV.  Untersuchungen

    • IV.1.  Löslichkeitsversuche

    • IV.2.  Bestimmung der Arzneistoff/CD-Komplexierung

    • IV.3.  In-vitro-Permeationsstudien durch isolierte Schweinecornea

      • IV.3.1. Theoretische Grundlagen

        • IV.3.1.1. In-vitro Modelle

        • IV.3.1.2.  Flux

        • IV.3.1.3. Permeabilitätskoeffizient

      • IV.3.2. Versuchsdurchführung

    • IV.4. In-vivo-Versuche (Kaninchen)

    • IV.5.  In-vivo-Versuche (Ratte)

  • V.  Ergebnisse und Diskussion

    • V.1. Betarezeptorenblocker

      • V.1.1.  In-vitro-Permeation aus Pufferlösungen

      • V.1.2.  In-vitro-Permeation aus Cyclodextrin-Formulierungen

        • V.1.2.1. Versuchsdurchführung

        • V.1.2.2.  Mepindolol / α-Cyclodextrine

        • V.1.2.3.  Mepindolol / HP-β-CD, HP-γ-CD

        • V.1.2.4.  Pindolol

        • V.1.2.5. Mepindolol / Pilocarpin-Kombinationen

        • V.1.2.6.  Wechselwirkungen mit Cyclodextrinen

          • V.1.2.6.1.  Pindolol

          • V.1.2.6.2.  Mepindolol

      • V.1.3. Corneale Verträglichkeit

      • V.1.4.  Kapitelzusammenfassung

    • V.2.  Mycophenolatmofetil (MMF) und Mycophenolsäure (MPA)

      • V.2.1. Intraokulare MMF / MPA-Verteilung

      • V.2.2. Vergleichende MMF- und MPA-Applikation

      • V.2.3. Mitreaktion des unbehandelten Auges

      • V.2.4. Resümee

      • V.2.5.  Kapitelzusammenfassung

    • V.3.  Selektive Glucocorticoidrezeptoragonisten

      • V.3.1. ZK 216771

        • V.3.1.1.  Rezepturentwicklung

        • V.3.1.2. In-vitro-Permeation

      • V.3.2.  ZK 247756

        • V.3.2.1.  Rezepturentwicklung

        • V.3.2.2.  In-vitro-Permeation

        • V.3.2.3.  In-vitro-Penetration

        • V.3.2.4. In-vivo-Studie nach Keratoplastik

      • V.3.3. Kapitelzusammenfassung

  • VI.  Material und Methoden

    • VI.1.  Verwendete Substanzen

    • VI.2. Methoden

      • VI.2.1. Physikalisch-chemische Methoden

        • VI.2.1.1. Viskosität

        • VI.2.1.2. Dichte

        • VI.2.1.3. Oberflächenspannung

        • VI.2.1.4.  Osmolalität

        • VI.2.1.5. pH-Wert

        • VI.2.1.6. Leitfähigkeit

        • VI.2.1.7. Verteilungskoeffizient

        • VI.2.1.8. Partikeldurchmesser

      • VI.2.2.  Gehaltsbestimmungen

        • VI.2.2.1.  Pilocarpin-HCl

        • VI.2.2.2. Betablocker

        • VI.2.2.3.  Mycophenolatmofetil / Mycophenolsäure

        • VI.2.2.4.  ZK 216771 / ZK 247756

        • VI.2.2.5. Cyclodextrine

      • VI.2.3. Arzneistoff / Cyclodextrin-Komplexe

        • VI.2.3.1.  Komplexherstellung

        • VI.2.3.2. Komplexcharakterisierung

          • VI.2.3.2.1.  Fourier-Transformations-Infrarotspektroskopie (FT-IR)

          • VI.2.3.2.2.  Röntgendiffraktometrie (X-RD)

          • VI.2.3.2.3.  Löslichkeitsstudien

      • VI.2.4.  Wirkstoffpermeation durch isolierte Schweinecornea

        • VI.2.4.1.  Präparation der Cornea

        • VI.2.4.2.  Permeationsapparatur

        • VI.2.4.3.  Versuchsdesign

        • VI.2.4.4.  Herstellung der Lösungen

          • VI.2.4.4.1.  Arzneistofflösungen

          • VI.2.4.4.2. Cyclodextrinlösungen

      • VI.2.5.  Wirkstoffpenetration in isolierte Schweinecornea

      • VI.2.6.  Verteilung von Mycophenolatmofetil am Kaninchenauge

        • VI.2.6.1.  Testlösungen

        • VI.2.6.2.  Tierversuche (Kaninchen)

        • VI.2.6.3.  Gewebeaufarbeitung

          • VI.2.6.3.1. Kammerwasser

          • VI.2.6.3.2.  Cornea / Sclera

          • VI.2.6.3.3.  Conjunctiva / Iris-Ziliarkörper

          • VI.2.6.3.4. Glaskörper / Plasma

      • VI.2.7. Herstellung okularer Formulierungen von ZK 216771 / 247756

        • VI.2.7.1.  ZK 216771

        • VI.2.7.2. ZK 247756

        • VI.2.7.3. Keratoplastik

          • VI.2.7.3.1. Tiere

          • VI.2.7.3.2. Tiermodell

          • VI.2.7.3.3. Chirurgie

          • VI.2.7.3.4.  Topische Behandlung der Ratten

          • VI.2.7.3.5.  Beurteilung der Transplantate

          • VI.2.7.3.6.  Bestimmung der immunologischen Parameter

      • VI.2.8.  Raster-Elektronenmikroskopie (REM)

      • VI.2.9. Statistik

        • VI.2.9.1.  Betarezeptorenblocker / Mycophenolatmofetil

        • VI.2.9.2. SEGRA (Keratoplastik)

  • VII.  Zusammenfassung

  • Literaturverzeichnis

  • Publikationen

  • Erklärung

Tabellen

  • Tabelle 1 : Eigenschaften und Zusammensetzung der humanen Tränenflüssigkeit; nach [177]

  • Tabelle 2 : Chemische Zusammensetzung des Kammerwassers1 im Vergleich zum Blutplasma; nach [177]

  • Tabelle 3 : Zusammenfassung der wichtigsten molekularen Mechanismen einer Anzahl von Glucocorticoid-Nebenwirkungen; nach [196]

  • Tabelle 4 : Chemische Struktur der verwendeten b-Blocker

  • Tabelle 5 : Relative Molekülmassen (Mr), Säure-Baseeigenschaften und Verteilungs-koeffizienten (VK) der verwendeten b-Rezeptorenblocker

  • Tabelle 6 : Pharmakologische Wirkungsparameter von b-Blockern; nach [ 108 ];
    ISA = Intrinsische sympathomimetische Aktivität als Maß für die agonistische Wirkung

  • Tabelle 7 : Handelspräparate (Betarezeptorenblocker in Ophthalmika)

  • Tabelle 8 : Stabilität von ZK 216771 in 0,05 M Phosphatpuffer (pH = 7,4) bei 37°C

  • Tabelle 9 : Einige Charakteristika der nativen a-, b- und g-Cyclodextrine und ausgewählter Derivate

  • Tabelle 10 : Einfluss von Cyclodextrinen auf die Eigenschaften einiger okular angewendeter Arzneistoffe

  • Tabelle 11 : Schwerlösliche Arzneistoffe

  • Tabelle 12 : Effektive Permeabilitätskoeffizienten (Peff) und nach 300 min kumulativ freigesetzte Arzneistoffmenge (Q300) für Betablocker (SchweinecorneaE)

  • Tabelle 13 : Permeabilitätsparameter von Mepindolol (MEP; 0,5% — bezogen auf die Base) sowie aus a- und HP-a-CD-Lösungen (isolierte SchweinecorneaE )

  • Tabelle 14 : Permeationsparameter von Mepindolol (MEP; 0,5% — bezogen auf die Base) ohne/nach Vorbehandlung der SchweinecorneaE mit Cyclodextrin (CD)-Lösungen

  • Tabelle 15 : Permeationsparameter von Mepindolol (MEP) durch isolierte SchweinecorneaE sowie in Gegenwart von 12,5% hydroxypropyliertem a-, b-, g-Cyclodextrin (CD) und 3,7% a-CD

  • Tabelle 16 : Permeationsparameter von Mepindololsulfat (MEP) durch isolierte SchweinecorneaT sowie in Gegenwart von HP-b/g-CD und a-CD

  • Tabelle 17 : Permeationsparameter für Pindolol
    (0,15%; aus Pindoptan® bzw. 12,5% HP-b/g-CD) durch isolierte SchweinecorneaE

  • Tabelle 18 : Permeationsparameter von 2% Pilocarpinhydrochlorid (P) durch isolierte SchweinecorneaE (1SchweinecorneaT) sowie in Gegenwart von Mepindolol (MEP, 0,5% — bezogen auf die Base) und 12,5% hydroxy-propyliertem a-, b- und g-Cyclodextrin (CD)

  • Tabelle 19 : Permeationsparameter von 2% Pilocarpinhydrochlorid (P) durch isolierte SchweinecorneaT (ohne/ mit 12,5% HP-b/g-CD)

  • Tabelle 20 : Permeationsparameter von 0,5% (berechnet auf die Base) Mepindololsulfat (MEP) durch isolierte SchweinecorneaE sowie in Gegenwart von 2% Pilocarpinhydrochlorid (P) und 12,5% hydroxypropyliertem a-, b- und g-Cyclodextrin (CD)

  • Tabelle 21 : Stabilitätskonstanten von Pindolol (PIN)/Cyclodextrin (CD)-Komplexen

  • Tabelle 22 : Löslichkeit (cS) von Pindolol durch hydroxypropyliertes b/g-Cyclodextrin (CD) im Vergleich

  • Tabelle 23 : Physikalische Kenngrößen einer MMF/HP-b-CD-Lösung; nach [202]

  • Tabelle 24 : MPA-Spiegel (30 und 60 min) im Kaninchenauge nach Applikation von MPA/CD bzw. MMF/CD

  • Tabelle 25 : MPA-Konzentrationen nach Applikation von MMF/CD, MMF/SP und MPA/CD im Referenzauge (links)

  • Tabelle 26 : Sättigungslöslichkeit (cS) von ZK 216771 in wässrigen Cyclodextrinlösungen

  • Tabelle 27 : Rezeptur wässriger Augentropfen von ZK 216771

  • Tabelle 28 : Stabilität von ZK 216771 in SPP pH 7,0 (33°C)

  • Tabelle 29 : Löslichkeit von ZK 247756 bei pH 4,0; nach [182]

  • Tabelle 30 : Mikroemulsion (ME) zur okularen Anwendung; nach [241]

  • Tabelle 31 : Physikalisch-chemische Eigenschaften der Mikroemulsion (ME);
    nach [241]

  • Tabelle 32 : Augentropfenrezeptur für ZK 247756
    (Mikroemulsionsbasis; ME-CD-SEGRA)

  • Tabelle 33 : Mittlere Transplantatüberlebenszeit (ÜLZ) nach Keratoplastik des rechten Auges bei Lewis-Ratten

  • Tabelle 34 : 0,5%ige Betablocker-Lösungen für die cornealen Permeationsstudien in vitro (berechnet auf die jeweilige Base)

  • Tabelle 35 : Rezepturen für okulare MMF/MPA-Formulierungen

  • Tabelle 36 : Zusammensetzung der Gemischten Mizellen; nach [182]

  • Tabelle 37 : Versuchsgruppen bei lokaler Therapie mit ZK 247756 nach Keratoplastik

Bilder

  • Abb. 1 : Schnitt durch den Augapfel; nach [177]

  • Abb. 2 : Tränenfilm; nach [ 177 ]

  • Abb. 3: Aufbau der Cornea; nach [185]

  • Abb. 4 : Wege, die die Bioverfügbarkeit topisch applizierter Ophthalmika beeinflussen; nach [122]

  • Abb. 5 : Absorptionswege topisch applizierter Ophthalmika; nach [122]

  • Abb. 6 : Weiter (A) und enger (B) Kammerwinkel; nach [146]

  • Abb. 7 : Hypothese für die Induktion molekularer Mechanismen für klassische GC und SEGRA; nach [196]

  • Abb. 8 : Ablauf der Immunkaskade mit Angriffsorten von Cyclosporin und Mycophenolat-mofetil; nach [179]; Doppelstrich: Hemmung durch MMF

  • Abb. 9 : Chemische Struktur (a) und zylindrische Gestalt (b) eines b-Cyclodextrin-Moleküls

  • Abb. 10 : Gleichgewicht: Wirtsfreier Arzneistoff und Gastmolekül (Cyclodextrin) mit ihrem 1:1-Komplex; nach [118]

  • Abb. 11 : Gleichgewicht: Freier Arzneistoff und Cyclodextrin mit ihrem 1:2-Komplex; nach [118]

  • Abb. 12 : Der vermutliche Mechanismus der Arzneistoffpenetration von wässrigen, cyclodextrinhaltigen Augentropfen; nach [122]

  • Abb. 13 : Verschiedene Typen von Löslichkeitsisothermen; nach [ 81 ]; A: löslicher Komplex; AL: linear, AP bzw. AN: nicht linear bei höherer CD-Konzentration; B: BS: Komplex besitzt schlechtere Löslichkeit als das Substrat, BI: Komplex fällt nach Erreichen einer Löslichkeitsgrenze aus

  • Abb. 14 : Konstanter Konzentrationsgradient eines durch die Membranbarriere M diffundierenden Stoffes; (D = Donatorphase,  A = Akzeptorphase; c (D/A): Konzentration in D/A); nach [136]

  • Abb. 15 : Permeabilitätskoeffizienten von Mepindolol (0,5%) durch isolierte SchweinecorneaE; Mittelwert ± SD (n = 6-10); *signifikant zur Referenz (sine CD) für p < 0,05

  • Abb. 16 : Permeation von a-CD durch isolierte SchweinecorneaT (Ausgangslösung: 3,7% α-CD); Mittelwert ± SD (n = 5)

  • Abb. 17 : Permeation von HP-a-CD durch isolierte SchweinecorneaT (Donatorlösung: 12,5% HP-a-CD); Mittelwert ± SD (n = 5)

  • Abb. 18 : Permeation von HP-b-CD durch isolierte SchweinecorneaT (Donatorlösung: 12,5% HP-b-CD); Mittelwert ± SD (n = 5)

  • Abb. 19 : Permeation von HP-g-CD durch isolierte SchweinecorneaT (Donatorlösung: 12,5% HP-g-CD); Mittelwert ± SD (n = 5)

  • Abb. 20 : Permeabilitätskoeffizienten von 2% Pilocarpinhydrochlorid (P) allein und in Kombination mit 0,5% (bezogen auf die Base) Mepindololsulfat (MEP) ohne/ unter Zugabe von 12,5% HP-α/β/γ-CD (SchweinecorneaE); Mittelwert ± SD (n = 5-9); *signifikant gegenüber der jeweiligen Referenz (sine CD); p < 0,05 (t-Test)

  • Abb. 21 : Permeabilitätskoeffizienten von 0,5% Mepindolol (MEP) allein und in Kombination mit 2% Pilocarpin (P) unter Zugabe von 12,5% HP- α/β/γ-CD (SchweinecorneaE); Mittelwert ± SD (n = 5-9); *signifikant gegenüber der jeweiligen Referenz (sine CD) für p < 0,05 (t-Test)

  • Abb. 22 : Arzneistofffreisetzung Q300 [%] von Mepindolol (MEP) und Pilocarpin (P) nach 300 min (SchweinecorneaE); Mittelwert ± SD (n = 5-9); *signifikant zum jeweiligen Wert in P/MEP für p < 0,05 (Single-Factor-Anova)

  • Abb. 23 : Löslichkeitsisothermen von Pindolol (PIN) in GBR-Puffer pH 7,4; (A): nach Autoklavieren (121°C, 200 kPa, 15 min); n = 3

  • Abb. 24 : FTIR-Spektren von MEP/ a-, b-CD (1 : 1); Ordinate: Transmission [%], Abszisse: Wellenzahl [cm-1]; PM = Physikalische Mischung, LP = Lyophilisat

  • Abb. 25 : Elektronenmikroskopische Aufnahmen des cornealen SchweineepitheliumsE, Vergrößerung x20000

  • Abb. 26 : MPA-Spiegel im Kammerwasser des Kaninchenauges nach Applikation von MMF/CD und MMF/SP; Mittelwert ± SD (n = 4); *signifikanter Unterschied zwischen MMF/CD und MMF/SP für p < 0,05 (t-Test und Single-Factor-Anova)

  • Abb. 27 : MPA-Gewebespiegel im Kaninchenauge nach Applikation von MMF/CD und MMF/SP; Mittelwert ± SD (n = 4); *signifikanter Unterschied zwischen MMF/CD und MMF/SP für p < 0,05 (t-Test und Single-Factor-Anova)

  • Abb. 28 : MPA-Spiegel im Glaskörper des Kaninchenauges nach Applikation von MMF/CD und MMF/SP; Mittelwert ± SD (n = 4)

  • Abb. 29 : MPA-Spiegel im Plasma des Kaninchenauges nach Applikation von MMF/CD und MMF/SP; Mittelwert ± SD (n = 4)

  • Abb. 30 : MMF-Gewebespiegel im Kaninchenauge nach Applikation von MMF/SP: Cornea (CR), Conjunctiva (CJ), Sclera (SC) und Iris-Ziliarkörper (IZ); Mittelwert ± SD (n = 4)

  • Abb. 31 : Kumulative Permeabilitätsraten durch isolierte SchweinecorneaT für das polarere Abbauprodukt von ZK 216771 (Kalibrierung mit der Ausgangsverbindung); Mittelwert ± SD (n = 5)

  • Abb. 32 : Kumulative Permeationsraten von ZK 247756 (ME-CD-SEGRA) durch die synthetische Membran Nephrophan®; Mittelwert ± SD (n = 5)

  • Abb. 33 : Penetration von ZK 247756 (ME-CD-SEGRA) in isolierte Schweinecornea, Mittelwert ± SD (n = 4); (*) signifikant zum 30 bzw. 60 min-Wert (t-Test und Single-Factor Anova)

  • Abb. 34 : Transplantatüberlebensrate/ zeit nach Keratoplastik bei Lewis-Ratten

  • Abb. 35 : Permeationszelle

  • Abb. 36 : Permeationsapparatur für Schweinecornea und Nephrophan®