Aus dem Institut für Anatomie
der Medizinischen Fakultät Charité
der Humboldt-Universität zu Berlin

DISSERTATION

Axonale Zielfindung im Hippocampus
während der Entwicklung und nach Läsion:
Analyse membran-assoziierter Faktoren für die Schichtenspezifität aussprossender Fasern

Zur Erlangung des akademischen Grades
Doctor medicinae (Dr. med.)

vorgelegt der Medizinischen Fakultät Charité
der Humboldt-Universität zu Berlin

von

Herrn Nicolai E. Savaskan
aus Berlin

den 20. Oktober 2001

Gutachter:
1. Prof. Dr. med. R. Nitsch aus Berlin
2. Prof. Dr. rer.nat. K. Krieglstein aus Göttingen
3. Prof. Dr. med. M. Frotscher aus Freiburg i. Breisgau

Datum der Promotion:Berlin, den 13. Mai 2002

Meinen Freunden

&

Für Gabriela und Engin

Inhaltsverzeichnis

• VORWORT
• 1  EINLEITUNG
  • 1.1 Der Hippocampus in der Grundlagenforschung
  • 1.2 Das Läsionsparadigma: Die Läsion des entorhinalen Cortex
  • 1.3 Ein sequestrierter Prozess im Hippocampus nach entorhinaler Cortex Läsion
  • 1.4 Mechanismen axonaler Wegfindung während der Entwicklung
  • 1.5 Membran-assoziierte Moleküle nach entorhinaler Cortex Läsion
• 2  AUFGABENSTELLUNG & EXPERIMENTELLE VERSUCHSANORDNUNG
  • 2.1 Fragestellung dieser Arbeit
  • 2.2  In vitro Assays in der zellbiologischen Forschung
  • 2.3  In vitro Assays zum Studium membran-assoziierter Faktoren
  • 2.4 Der Streifenassay und der Längenauswachsassay
• 3  MATERIAL UND METHODEN
  • 3.1 Tiere und stereotaktische Operation
  • 3.2 Methodologische Überlegungen
    • 3.2.1 Fluoro-Jade (FJ) Färbung und AChE-Histochemie
  • 3.3 Präparation der Explantate
  • 3.4 Membran– und Myelinpräparation
  • 3.5 Streifenassay, Längenauswachsassay und Explantatkultivierung
  • 3.6 Analyse des Streifen- und Auswachsassays
  • 3.7 Immunohistochemische Nachweisverfahren zur Darstellung von Myelin
  • 3.8 Verwendete Mikroskope und Bildgebungsverfahren
• 4  ERGEBNISSE
  • 4.1 Streifenassay und repulsive Faktoren
  • 4.2 Das Auswachsen entorhinaler Axone ist abhängig vom Zielgebiet
  • 4.3 Das Auswachsen entorhinaler Axone ist abhängig von der Maturation seines Zielgebiets, des Hippocampus
  • 4.4 Myelin hat einen starken inhibitorischen Effekt auf die axonale Auswachslänge
  • 4.5 Myelin beeinflusst nicht das axonale Auswahlverhalten
  • 4.6 Der Einfluss von Membranen deafferenzierter Hippocampi auf das gerichtete axonale Auswachsen
  • 4.7 Auswachslängen entorhinaler Axone auf Membranen  deafferenzierter Hippocampi
  • 4.8 Phospholipasebehandlung von Membranen adulter Hippocampi fördert das axonale Längenwachstum
  • 4.9 Entorhinale Axone zeigen keine Präferenz zwischen postnatalen und adulten hippocampalen Membranen 10 Tage nach Läsion
• 5  Diskussion
  • 5.1 Synopsis
  • 5.2 Membran-assoziierte Moleküle während der Entwicklung
  • 5.3 Myelin und axonale Elongation
  • 5.4  Zielgerichtetes axonales Auswachsen nach Läsion
  • 5.5 Reaktive Astrozyten und Extrazelluläre Matrix Moleküle nach Läsion
  • 5.6 Axonales Aussprossen und Regeneration?
• 6  ZUSAMMENFASSUNG
• 7  SUMMARY
• LISTE VERWENDETER ABKÜRZUNGEN
• LITERATURVERZEICHNIS
• DANKSAGUNG
• VERÖFFENTLICHUNGEN
• EIDESSTATTLICHE ERKLÄRUNG

Tabellen

• Tab. 1:
• Tab. 2:
• Tab. 3:
• Tab. 4:

Bilder

• Abb. 1:
• Abb. 2:
• Abb. 3:
• Abb. 4:
• Abb. 5:
• Abb. 6:
• Abb. 7:
• Abb. 8:
• Abb. 9:
• Abb. 10:
• Abb. 11:
• Abb. 12:
• Abb. 13:
• Abb. 14:
• Abb. 15:
• Abb. 16: