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Test |
Reaktion |
|
Oxidasetest |
Zur Überprüfung der Oxidaseaktivität wurden Oxidaseteststäbchen von Merck verwendet. Eine violette Färbung der beimpften Stelle des Stäbchens zeigte eine positive Reaktion an. |
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Katalasetest |
Eine isolierte Kolonie wurde auf einem Objektträger in einem Tropfen 3 %-iger Wasserstoffperoxidlösung suspendiert. Die sofortige Bildung von Gasblasen zeigt eine positive Reaktion an. |
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O/F-Test Test auf Oxidation/Fer-mentation von Kohlenhydraten |
Für jede verdächtige Kolonie wurden 2 Röhrchen eingesetzt, ein Röhrchen wurde mit Paraffin überschichtet. Das stichbeimpfte Medium wurde 48 Stunden bei +30° C bebrütet. Ein fermentativer Kohlenhydratabbau wird durch den Farbumschlag beider Röhrchen von blau nach gelb angezeigt. Ein oxidativer Kohlenhydratabbau zeigt sich im Farbumschlag des unbedeckten Röhrchens nur an der Oberfläche oder im oberen Teil, während das bedeckte Röhrchen unverändert bleibt. Erfolgte kein Abbau des Kohlenhydrats, bleiben beide Röhrchen unverändert. |
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AHM |
Es erfolgte eine Stichbeimpfung der Medien mit den verdächtigen Kolonien. Nach 24-48 Stunden bei + 30° C wird abgelesen. Folgende Reaktionen weisen auf bewegliche Aeromonas spp. hin: |
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Äsculin-Hydrolyse-Test |
Nach Beimpfung mit der verdächtigen Kolonie wurde bei +30° C 24-48 Stunden bebrütet. Eine positive Reaktion zeigt sich in der Spaltung des Äsculins in Äsculetin unter Reduzierung des Eisensalzes, erkennbar an der Schwarzfärbung der Bouillon. |
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Zuckerverwert-ung in Hottinger-Bouillon |
Nach Beimpfung mit der verdächtigen Kolonie erfolgte die Bebrütung bei +30° C bis zu 4 Tage. Durch Zuckerabbau (Glucose, Salicin, L-Arabinose) entsteht organische Säure. Dadurch sinkt der pH-Wert und es kommt zum Farbumschlag des Indikators Bromthymolblau von Blau nach Gelb. Ein eindeutiger Farbumschlag nach Gelb stellt eine positive Reaktion dar. Das aus dem Glucosestoffwechsel entstandene Gas wird in dem in das Nährmedium eingestellten Durhamröhrchen angezeigt. |
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Voges-Proskauer-Reaktion |
Nach der Bebrütung der beimpften Röhrchen wurde 48 Stunden bei + 30° C bebrütet. Der Test beruht auf dem Nachweis von Acetylmethylcarbinol, einem Kohlenhydratstoffwechselprodukt, das in alkalischem Milieu eine Rotfärbung mit α-Naphthol bildet. Nach 48-stündiger Bebrütung wird von der VP-Bouillon 1 ml entnommen, 0,6 ml α -Naphthol und 0,2 ml 40 %-ige KOH hinzugefügt und gut durchmischt. Die Rotfärbung tritt nach 15-30 Minuten auf. |
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Lysin-Decarboxylase |
Die Bebrütung dauerte bis zu 4 Tage bei + 30°C. Der durch den Indikator Bromkresolpurpur violett gefärbte Nährboden schlägt bei einem Glucoseabbau zunächst nach Gelb um. Durch den Glucoseabbau wird ein saures Milieu geschaffen, das die Decarboxylierung von L-Lysin begünstigt. Es entsteht NH3, was zur Erhöhung des pH-Wertes führt. Es tritt erneut eine Violett-Färbung der Bouillon auf. Eine negative Reaktion äußert sich im Bestehenbleiben der Gelbfärbung oder im Ausbleiben des Farbumschlages, da kein fermentativer Glucoseabbau stattgefunden hat. |
Tabelle A M-2: Biochemische Differenzierungsreaktionen bei der Bestimmung von Vibrionen in Zandergewebe
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Test |
Reaktion |
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Kligler-Eisen |
Nach der Beimpfung der Hochschichtröhrchen wurde 24 Stunden bei + 37°C bebrütet. Eine Identifizierung erfolgte auf der Basis einer zweifachen Zuckerverwertung und der Sulfid-Bildung mit Eisencitrat als Indikator für die H2S-Bildung. Die Kohlenhydratverwertung wird durch Säure- bzw. Alkalibildung in der Hochschicht und in der Schrägfläche und damit durch einen Farbumschlag angezeigt. Gelbe Hochschicht / rote Schrägschicht: Glucose-positiv, Lactose-negativ; gelbe Hochschicht / gelbe Schrägschicht: Glucose-positiv, Lactose-positiv; rote Hochschicht / rote Schrägschicht: Glucose-negativ, Lactose-neagtiv. Eine H2S-Bildung wird durch eine Schwärzung des gesamten oder eines Teiles der Hochschicht erkennbar. Zusätzlich kann eine Gasbildung durch Blasenbildung oder durch ein Aufreißen des Agars festgestellt werden. |
|
ONPG (β-Galactosidase-Aktivität) |
Für jeden Einzelnachweis wurde eine ONPG-Scheibe in ein steriles Röhrchen gegeben und 0,1 ml sterile Kochsalzlösung hinzugegeben. Etwas Zellmasse wurde im Röhrchen suspendiert. Die Röhrchen wurden bei + 37°C bebrütet und stündlich auf eine Farbveränderung begutachtet. Beim ONPG-Test ersetzt ein synthetisches Galactosid (o-Nitrophenyl-ß-D-galactopyranosid) das Substrat Lactose. Es wird wie Lactose durch die Galactosid-Permease in die Zelle hineingebracht und durch die ß-Galactosidase hydrolysiert, und es entstehen die beiden Produkte Galactose und o-Nitrophenol, wobei das letztere gelb gefärbt ist. Eine Gelbfärbung zeigt einen positive ONPG-Test an. Keime, die nach 6 Stunden keine positive Farbveränderung zeigen, sollten bis zu 24 Stunden weiter bebrütet werden. |
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O 129-Scheiben (10 und 150 µg) |
Die Oberfläche einer Blutagar-Platte wurde gleichmäßig mit dem zu testenden Keim beimpft, und jeweils eine O129 -Scheibe mit 10 µg und eine mit 150 µg auf die Platte gelegt. Nach 24 Stunden Bebrütung bei + 37° C wurden die Platten auf Hemmhöfe begutachtet. Die O129 -Scheiben sind mit 10 µg bzw. 150 µg der vibriostatischen Substanz O129 (2,4-Diamino-6,7-diisopropyl-pteridin-phosphat) beladen. Der Grad der Empfindlichkeit variiert bei den einzelnen Vibrio-Arten. |
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Ornithindecarboxy-lase-Aktivität und Arginindihydrolse-Aktivität |
Die Nährböden in den Röhrchen wurden beimpft, mit Paraffin überschichtet und bis zu 4 Tagen bei + 30°C bebrütet. Die Bouillon enthält Ornithin oder Arginin als Reaktionskörper und Bromkresolpurpur als pH-Indikator. Der Test ist nur für Mikroorganismen geeignet, die Glucose unter Säurebildung verwerten können. Zunächst wird Glucose zu Säure abgebaut. Bei einem pH-Wert unter 5,6 schlägt die Farbe des pH-Indikators nach Gelb um. Ornithindecarboxylase-positive bzw. Arginindihydrolase-positive Bakterien bewirken durch den Abbau von Ornithin bzw. Arginin danach wieder einen pH-Anstieg. Die Nährböden färben sich violett. |
Tabelle A M-3: Biochemische Differenzierungsreaktionen bei der Bestimmung von Listeria spp. und der Speziesdifferenzierung von Listeria monocytogenes
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Test |
Reaktion |
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Reaktionen zur Gattungsdifferenzierung von Listeria spp. |
|
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Katalasetest |
Eine isolierte Kolonie wurde auf einem Objektträger in einem Tropfen 3 %-iger Wasserstoffperoxidlösung suspendiert. Die sofortige Bildung von Gasblasen zeigt eine positive Reaktion an. |
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Gramfärbung |
Die Gramfärbung wurde mit einer isolierten Kolonie durchgeführt und diente zur Beurteilung des Gramverhaltens und der Bakterienmorphologie. Listeria spp. sind gram-positive dünne kurze Stäbchen. |
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Beweglichkeitsprü-fung |
Eine Kolonie wurde von TSYE-Agar abgenommen, in TSYE-Bouillon suspendiert und 8 bis 24 Stunden bei +25°C bebrütet. Das Beweglichkeitsmedium im Röhrchen wurde mit einer Kultur aus der TSYE-Bouillon mit Hilfe einer Impfnadel beimpft und 48 Stunden im Brutschrank bei +25°C bebrütet. Das Wachstum um den Einstich wird geprüft. Listeria spp. sind beweglich und zeigen ein typisches schirmförmiges Wachstum. |
|
Reaktionen zur Speziesdifferenzierung von Listeria monocytogenes |
|
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Hämolyse |
Zur Bestimmung der Hämolyse-Reaktion wurden Schafblutagar-Platten beimpft. Mit einer Impfnadel wurden die verdächtigen Kulturen in die Agarplatte gestochen. Gleichzeitig dienten L.monocytogenes- und L.innocua-Stämme als positive bzw. negative Kontrollen. Nach 24 Stunden Bebrütung zeigte L.monocytogenes eine enge, klare, helle Zone (ß-Hämolyse) und L.innocua keine klare Zone. |
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Kohlenhydratabbau |
Jede Kohlenhydratbouillon (Xylose und Rhamnose) wurde beimpft und bis zu 5 Tagen bei + 37°C bebrütet. Positive Reaktionen (Säurebildung) werden durch eine Gelbfärbung angezeigt. |
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CAMP-Test |
Zwischen den senkrecht auf einer Schafblutagarplatte ausgestrichenen Staphylococcus aureus- und Rhodococcus equi-Stämmen wurden die verdächtigen Prüfstämme waagerecht aufgetragen. L.monocytogenes Stämme lassen sich durch verstärkte ß-Hämolysezone in der Nähe des Staph.aureus-Impfstriches erkennen, diese Hämolyse ist ebenso bei L.seeligeri zu verzeichnen. Im Gegensatz dazu bildet L.innocua keinerlei Hämolysezonen aus, und L.ivanovii zeigt eine typische pfeilförmige Hämolyse in der Nähe des Rh.equi Impfstriches. |
Tabelle A E-1: Winterversuche 1999, Gesamtkeimzahlen in log KbE/g in der Rückenmuskulatur ausgenommener Regenbogenforellen
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Tabelle A E-2: Winterversuche 1999, Gesamtkeimzahlen in log KbE/g in der Rückenmuskulatur runder Regenbogenforellen
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Tabelle A E-3: Winterversuche 1999, Gesamtkeimzahlen in log KbE/cm² auf der Haut ausgenommener Regenbogenforellen
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Tabelle A E-4: Winterversuche 1999, Gesamtkeimzahlen in log KbE/cm² auf der Haut runder Regenbogenforellen
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Tabelle A E-5: Winterversuche 1999, Gehalt an Pseudomonaden in log KbE/g in der Rückenmuskulatur ausgenommener Regenbogenforellen
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Tabelle A E-6: Winterversuche 1999, Gehalt an Pseudomonaden in log KbE/g in der Rückenmuskulatur runder Regenbogenforellen
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Tabelle A E-7: Winterversuche 1999, Gehalt an Pseudomonaden in log KbE/cm² auf der Haut ausgenommener Regenbogenforellen
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Tabelle A E-8: Winterversuche 1999, Gehalt an Pseudomonaden in log KbE/cm² auf der Haut runder Regenbogenforellen
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Tabelle A E-9: Sommerversuche 2001 -Versuch Nr. 1, Gesamtkeimzahl, Gehalt an Pseudomonaden und Enterobacteriaceae in log KbE/cm² auf der Haut ausgenommener Regenbogenforellen
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Tabelle A E-13: Sommerversuche 2001 -Versuch Nr. 1, Gesamtkeimzahl, Gehalt an Pseudomonaden und Enterobacteriaceae in log KbE/g im Bauchlappengewebe ausgenommener Regenbogenforellen
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Tabelle A E-14: Sommerversuche 2001, Versuche Nr. 2 und 3, Gesamtkeimzahl in log KbE/g im Darm runder Regenbogenforellen
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Tabelle A E-16: Sommerversuche 2001 -Versuch Nr. 1, Differenzierung verschiedener auf VRBG-Agar gewachsener Keime aus Darm-, Bauchlappen- und Haut-Proben von Regenbogenforellen, D = Darm, BL = Bauchlappen, H = Haut, Ox = Oxidasetest, Kat = Katalaseaktivität, Bew. = Beweglichkeit, Stäb. = Stäbchenbakterien, kl. = klein, O/F = oxidativer/fermentativer Glucoseabbau
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Probe |
auf VRBG |
auf Blutagar |
Gram- KOH-Test |
Ox |
Kat |
O/F |
Bew. |
Api 20 E |
Gramfärbung |
|
D |
groß, erhaben. weißlichgelb |
groß, grauweiß, glänzend |
(-), kl. kurze Stäb. |
- |
+ |
sehr gut, Hafna alvei 1 | |||
|
D |
groß, erhaben. weißlichgelb |
groß, grauweiß, glänzend |
(-), kl. kurze Stäb. |
- |
+ | ||||
|
D |
kl., trocken, flach, bläulich |
groß, gräulich-weiß, glänzend |
(-), kl. kurze Stäb. |
- |
O/F |
+ |
n.id. wenn gel(-), dann Salm. choleraesuis oder Hafnia alvei 2 |
(+) dunkellila, kl kurze Stäb, Kommas |
|
|
D |
kl., erhaben, roter als Nr. 3 |
groß, gräulich-weiß, glänzend |
(-) kurze kl. Stäb. |
- |
+ | ||||
|
BL |
groß, erhaben, weißlich-gelblich |
groß, gelblich, feucht |
(-) kl. kurze Stäb. |
- |
+ |
(+) dunkellila, kl kurze Stäb, Kommas |
|||
|
BL |
groß, flach, mehrer Ringe hintereinander |
mittelgroß, dicht, weiß, glänzend |
(-) kl. kurze Stäb. |
- |
+ |
gut, Escherichia vulneris |
(+) dunkellila, kl kurze Stäb, Kommas |
||
|
H |
2 mm, weinrot, leicht glänzend |
trocken, dichtere Mitte, groß |
(-) kl. kurze Stäb. |
- |
+ |
(+) lila, kurz, fast kokkoide Stäb |
|||
|
H |
2 mm, lila, Ringe, trocken |
kl., grauweiß, glänzend |
(-) kl. kurze Stäb. |
- |
(+) | ||||
|
D |
hellrosa-weißlich, groß, unregelmäßiger Rand, feucht |
mittelgroß, hämolytisch,. grauweiß |
(-) dünne Stäb. länglich |
+ |
+ | ||||
|
D |
dunkelrot, groß, flach, unregelmäß. Rand, trocken |
groß, hämolytisch, feucht, gelb-grau |
(-) dünne Stäb. länglich |
+ |
(+) |
(-) rosalila, zarte Stäb, etwas länger als Nr. 10 |
|||
|
D |
mittelgroß, rosa-weiß, erhaben, feucht |
starke Hämolyse |
(-) dünne kurze Stäb. |
+ |
+ |
gut, Aeromonas hydrophila/caviae |
(+) lila kurze dünne Stäb |
||
|
D |
groß, vulkanartig, unregelmäß., trocken, lila |
mittelgroß, grauweiß, glänzend |
(-) kokkoide Stäb |
- |
+ |
ungenügend, Salm. choleraesuis |
(-) rosalila, kurze fast runde Stäb |
||
|
D |
kleiner, erhaben, rot, feucht rund |
mittelgroß, grauweiß, glänzend |
(-)winzige Kokken |
- |
O/F | ||||
|
D |
gelb, groß, erhaben |
klein, hellgrau, glänzend |
(-) kurz Stäb. |
- |
- |
ungenügend, 0 % Mob: Hafnia alvei 2; 95 % Mob: Salm. choleraesuis |
(+) lila, kurze fast kokkoid |
||
|
D |
flach, rot, groß, |
klein, hellgrau, glänzend |
(-) winzige Stäb. |
- |
+ | ||||
|
D |
milchig, rosa, erhaben, schleimig |
mittelgroß, weißgrau glänzend |
(-) kurze Stäb. |
- |
- |
sehr gut, Hafnia alvei 1 |
(+) lila, kurz etw. länglicher als 4D6 |
||
|
D |
gelb, groß, erhaben |
weißgrau, kleiner, glänzend |
(-) kurze Stäb. |
- |
- | ||||
|
D |
flach lila |
weißgrau, kleiner, glänzend |
(-) kurze Stäb. |
- |
O/F |
+ |
ungenügend Salm. cholearaesuis |
(-) dunkellila, fast runde Stäb |
Tabelle A E-17: Bestimmung der Gesamtkeimzahl (GKZ), der Pseudomonaden-Keimzahl und der spezifischen Verderbskeime (specific spoilage organism SSO) in log KbE/g im Darm von Zandern
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Tabelle A E-18: Bestimmung der Gesamtkeimzahl (GKZ), der Pseudomonaden-Keimzahl und der spezifischen Verderbskeime (specific spoilage organism SSO) in log KbE/cm² auf der Haut von nicht ausgenommenen und ungewaschenen Zandern
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Verdünnung |
Wachstum + |
Oxidase - |
Glucose + |
Code und entsprechendes MPN/g oder cm² |
|
-1 -2 -3 |
1 0 0 |
1 0 0 |
1 0 0 |
1 0 0 0,36 MPN/g oder cm² (Konfidenzintervall 0,02 bis 1,70 bei 95 %) |
|
-1 -2 -3 |
3 3 3 |
0 0 1 |
0 0 1 |
0 0 1 0,30 MPN/g oder cm² (Konfidenzintervall 0,01 bis 0,95 bei 95 %) |
|
-1 -2 -3 |
3 3 3 |
1 1 0 |
0 1 0 |
0 1 0 0,30 MPN/g oder cm² (Konfidenzintervall 0,01 bis 1,00 bei 95 %) |
|
-1 -2 -3 |
3 3 3 |
0 2 0 |
0 2 0 |
0 2 0 0,62 MPN/g oder cm² (Konfidenzintervall 0,12 bis 1,70 bei 95 %) |
Tabelle A E-21: Differenzierung von verschiedenen auf VRBG gewachsenen Enterobacteriaceae-verdächtigen Isolaten aus Haut- und Darmproben von Zandern
|
Herkunft |
Nr. |
auf VRBG |
auf Blutagar |
Gramfärbung |
Ox. |
Kat. |
O/F |
ONPG |
|
D |
1 |
weißlich, schleimig, Mitte gelblich |
gräulich weiß, leichte Hämol. |
gram- Stäbchen |
- |
+ |
- |
+ |
|
D |
2 |
gr. dunkellila, trocken, leicht erhaben, dropsform |
blasser, kleiner, erhaben glänzend, leicht gelblich |
gram- Stäbchen |
+ |
+ |
F |
+ |
|
D |
3 |
trocken, dunkellila, erhaben |
weiß, schleimig, groß, glänzend |
gram- Stäbchen |
+ |
+ |
F |
+ |
|
HL |
5 |
gelb in Mitte, schleimig, Geruch: mach Alkohol, sauer |
klein, weißlichgrau, leichte Hämol. |
gram- Stäbchen |
- |
+ |
- |
+ |
|
HV |
6 |
flach, trocken, dunkelrosa, dropsform (heller als Nr 2) |
gelblich weiß, keine Hämol. |
gram- Stäbchen |
- |
+ |
OF |
+ |
|
HV |
7 |
schleimig, rosa Knopf, |
starke Hämol. |
gram- Stäbchen |
+ |
+ |
OF |
+ |
|
HV |
8 |
schleimig, rosa Knopf, |
starke Hämol. |
gram- Stäbchen |
+ |
+ |
OF |
+ |
|
HV |
9 |
pink, größer als Nr. 8, glänzend |
Hämol. |
gram- Stäbchen |
+ |
+ |
OF |
+ |
|
HV |
10 |
schleimig, rosa gelber Hof, rosa Knopf |
weißlich gelb, starke Hämol. |
gram- Stäbchen |
+ |
+ |
OF |
+ |
|
Herkunft |
Nr. |
Bew. |
Kligl. |
ADH |
ODC |
LDC |
VP |
Api 20 E |
0 % NaCl. |
1 % NaCl |
3 % NaCl |
6 % NaCl |
8 % NaCl |
10 % NaCl |
|
D |
1 |
- |
g/org |
- |
- |
+ |
ungenügende Diff. |
(+) |
- |
- |
- |
- |
- |
|
|
D |
2 |
- |
g/org |
- |
- |
- |
- |
nicht identifizierbar |
- |
+ |
+ |
(+) |
- |
- |
|
D |
3 |
- |
g/org |
- |
- |
- |
- |
nicht identifizierbar |
(+) |
+ |
+ |
(+) |
- |
- |
|
HL |
5 |
- |
g/org |
- |
- |
ungenüg. Sphmon. paucimobilis |
+ |
+ |
+ |
(+) |
- |
- |
||
|
HV |
6 |
+ |
r/g |
- |
- |
- |
- |
Enterobacter agglomerans 5 |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
|
HV |
7 |
+ |
r/g |
+ |
- |
- |
+ |
Aeromonas salmonicida (gut) |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
|
HV |
8 |
+ |
r/g |
+ |
- |
- |
+ |
Pasteurella multocida |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
|
HV |
9 |
+ |
r/g |
+ |
- |
- |
+ |
Pasteurella multocida |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
|
HV |
10 |
+ |
r/g |
+ |
- |
- |
Pasteurella multocida |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
Tabelle A E-22: Zander, Biochemische Differenzierung von Vibrio-. und Aeromonas- verdächtigen Isolaten der ersten und zweiten Anreicherung von Hauttupferproben in alkalischem Peptonwasser, ausgestrichen auf TCBS-Agar und RYAN-Agar
Tabelle A E-23: Zander, Differenzierung von Isolaten aus Darm- und Bauchlappenproben; Lagerungs-Tag 1: Fische 1 bis 5; Lagerungs-Tag 8: Fische 26 bis 30; Untersuchung auf Clostridien, Kat. = Katalasereaktion
|
Tag 1 |
Trübung |
Schwärz-ung |
Gasbild-ung |
Wachstum auf Blut aerob |
Wachstum auf Blut anaerob |
Kat. aerob |
Kat. anaerob |
Kat. 2.Ausstrich aerob |
Kat. 2.Ausstrich anaerob |
|
D1a D1b |
(+) + |
- - |
- - |
- |
- | ||||
|
D2a D2b |
- - |
- - |
- - | ||||||
|
D3a D3b |
- (+) |
- - |
- - |
- |
- | ||||
|
D4a D4b |
+ + |
- - |
- - |
+ + |
+ + |
- - |
- - |
- |
- |
|
D5a D5b |
+ + |
- - |
- (+) |
+ + |
+ + |
- + |
- + |
- |
- |
|
B1a B1b |
+ + |
- + |
(+) + |
+ + |
+ + |
- + |
- - |
- - |
- - |
|
B2a B2b |
(+) - |
- - |
((+)) - |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
|
B3a B3b |
+ + |
- - |
- ((+)) |
+ + |
+ + |
+ + |
- + |
- |
- |
|
B4a B4b |
- + |
- - |
- - |
+ |
+ |
+ |
+ | ||
|
B5a B5b |
(+) + |
- - |
- ((+)) |
- + |
- + |
+ |
+ | ||
|
Cl. perfr. |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
|
Tag 8 |
Trübung |
Schwärz-ung |
Gasbild-ung |
Wachstum auf Blut aerob |
Wachstum auf Blut anaerob |
Kat. aerob |
Kat. anaerob |
Kat. 2.Ausstrich aerob |
Kat. 2.Ausstrich anaerob |
|
D26a D26b |
+ (+) |
- - |
(+) (+) |
+ + |
- - |
- + | |||
|
D27a D27b |
+ + |
- + |
(+) (+) |
+ + |
+ + |
+ |
- - |
+ - |
+ - |
|
D28a D28b |
+ + |
+ - |
+ + |
+ + |
+ + |
+ + |
- - |
+ + |
+ + |
|
D29a D29b |
+ + |
+ - |
+ + |
+ + |
+ + |
+ + |
+ + | ||
|
D30a D30b |
(+) + |
- - |
((+)) - |
- - |
- - | ||||
|
B26a B26b |
+ + |
- - |
- ((+)) |
- - |
- (+) |
- | |||
|
B27a B27b |
+ + |
- - |
((+)) (+) |
+ + |
- - |
- + |
- - |
+ |
+ |
|
B28a B28b |
+ + |
- + |
+ - |
+ + |
- + |
+ |
+ | ||
|
B29a B29b |
+ + |
- - |
- - |
+ + |
- + |
+ - |
+ | ||
|
B30a B30b |
+ + |
- - |
(+) (+) |
+ + |
+ + |
- |
+ + |
|
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Nährmedienzusammensetzung:
0,1% Peptonkochsalzlösung
|
Pepton |
1,0 g |
|
NaCl |
8,5 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
0,1% Peptonkochsalzlösung +Agar in Verdünnungsröhrchen für Tropfplattenverfahren
|
Pepton |
1,0 g |
|
NaCl |
8,5 g |
|
Agar |
0,75 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
1% gepuffertes Peptonwasser für Voranreicherung von Salmonellen
|
Pepton |
10,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
di-Natriumhydrogenphospht-Dodekahydrat (Na2HPO4-12H20) |
9,0 g |
|
Kaliumdihydrogenphosphat (KH2PO4) |
1,5 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,0 |
PC-Agar: Plate-Count-Nährboden , (Oxoid CM 325)
Caseinpepton-Hefeextrakt-Glucose-Agar
|
Caseinpepton |
5,0 g |
|
Hefeextrakt |
2,5 g |
|
Glucose |
1,0 g |
|
Agar |
9,0 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,0+/- 0,2 |
ECD-Agar: Escherischia-Coli-Direkt-Agar
|
Pepton aus Casein, tryptisch verdaut |
20,0 g |
|
Lactose |
5,0 g |
|
Tryptophan |
1,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Gallensalze |
1,5 g |
|
Di-Kaliumhydrogenphosphat K2HPO4 |
4,0 g |
|
Kaliumdihydrogenphosphat KH2PO4 |
1,5 g |
|
4-Methylumbelliferyl-ß-D-Glucuronid |
0,07g |
|
Agar |
12 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,0+/- 0,1 |
|
| [Seite 224↓] |
VRBG-Agar: Kristallviolett-Neutralrot-Galle-Glucose-Agar nach Mossel (Merck Art.Nr.10275)
|
Pepton aus Fleisch |
7,0 g |
|
Hefeextrakt |
3,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Glucose |
10,0 g |
|
Gallesalzmischung |
1,5 g |
|
Neutralrot |
0,03 g |
|
Kristallviolett |
0,002 g |
|
Agar |
12,0 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,4+/-0,1 |
SCA-Agar: Sulfit-Cycloserin-Azid-Agar (Oxoid CM587 Tryptose-Sulfit-Cycloserin-Selektivnährboden)
|
Tryptose |
15,0 g |
|
Pepton aus Sojamehl |
5,0 g |
|
Hefeextrakt |
5,0 g |
|
Fleischextrakt |
5,0 g |
|
Glucose |
2,0 g |
|
Ammoniumeisen(III)-citrat |
0,5 g |
|
Natriummetabisulfit (Na2S2O5) |
0,5 g |
|
Agar |
12 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,4+/-0,2 |
Cycloserin-Azid-Lösung (1ml pro 100ml Agar)
|
D-Cycloserin |
1,5 g |
|
Natriumazid |
0,25 g |
|
Aqua dest. |
50 ml |
GSP-Agar: Pseudomonaden-Aeromonaden-Selektivagar nach Kielwein,
(Merck Art-Nr.1.10230.0500)
|
Natrium-L(+)-glutamat |
10,0 g |
|
Stärke, löslich |
20,1 g |
|
Kaliumdihydrogenphosphat |
2,0 g |
|
Magnesiumsulfat |
0,5 g |
|
Phenolrot |
0,36 g |
|
Agar |
12,0 g |
|
Aqua dest |
1000 ml |
|
pH 7,2+/-0,2 |
zusätzlich: Penicillin-G-Natrium 100.000I.E. ( Merck 1.06993.0010)
|
| [Seite 225↓] |
Ryan-Agar: Aeromonas-Selektivnährboden nach Ryan (Oxoid CM 833)
|
Proteose-Pepton |
5,0 g |
|
Hefeextrakt |
3,0 g |
|
L-Lysin |
3,5 g |
|
L-Arginin |
2,0 g |
|
Inosit |
2,5 g |
|
Lactose |
1,5 g |
|
Sorbit |
3,0 g |
|
Xylose |
3,74 g |
|
Gallensalze Nr.3 |
3,0 g |
|
Natriumthiosulfat |
10,67 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Eisen(III)-ammoniumcitrat |
0,8 g |
|
Bromthymolblau |
0,04 g |
|
Thymolblau |
0,14 g |
|
Agar |
12,5 g |
|
Ampicillin-Selektiv-Supplement |
2,5 mg |
|
Aqua dest. |
500 ml |
|
pH 8,0 +/- 0,1 |
FRASER-Listeria-Selektiv-Anreicherungsbouillon-Basis (Merck Art.Nr.1.10398.0500)
erstes selektives Areicherungsmedium 1/2 -Fraser-Bouillon
|
Protease Pepton |
5,0 g |
|
Pepton aus Casein |
5,0 g |
|
Hefeextrakt |
5,0 g |
|
Fleischextrakt |
5,0 g |
|
Natriumchlorid |
20,0 g |
|
di-Natriumhydrogenphosphat |
12,0 g |
|
Kaliumdihydrogenphosphat |
1,35 g |
|
Äskulin |
1,0 g |
|
Lithiumchlorid |
3,0 g |
|
Aqua dest |
1000 ml |
|
pH 7,2+/-0,2 |
ein Volumenteil Lithiumchlorid und jeweils ein halbes Volumenteil an Acriflavin und Nalidixinsäure
FRASER-Listeria-Selektiv-Anreicherungsbouillon-Basis
zweites selektives Anreicherungsmedium mit vollständigen Konzentrationen an selektiven Agentien; Zusammensetzung: siehe oben
Zusatz von Fraser-Listeria-Supplement (Merck Art.Nr.1.10399.0001)
|
Ammoniumeisen(III)-citrat |
5 g |
|
Selektivsupplement: | |
|
Acriflavin |
0,125 g |
|
Nalidixinsäure |
0,10 g |
|
| [Seite 226↓] |
OXFORD-Listeria-Selektivagar (Basis) (Merck Art.Nr.1.07004.0500)
|
Peptone |
23,0 g |
|
Stärke |
1,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Agar |
13,0 g |
|
Äskulin |
1 g |
|
Ammoniumeisen(III)-citrat |
0,5 g |
|
Lithiumchlorid |
15 g |
|
Aqua.dest |
1000 ml |
|
pH 7,0 +/- 0,2 |
OXFORD-Listeria-Selektivsupplement (Merck Art.Nr. 1.07006.0001)
|
Cycloheximid |
400 mg |
|
Colistinsulfat |
20 mg |
|
Acriflavin-Hydrochlorid |
5,0 mg |
|
Cefotetan |
2,0 mg |
|
Fosfomycin |
10 mg |
|
Ethanol |
5 ml |
|
Aqua dest. |
5 ml |
PALCAM-Listeria-Selektivagar (Basis) nach Van Netten (Merck Art.Nr. 1.11755.0500)
|
Peptone |
23,0 g |
|
Stärke |
1,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Hefeextrakt |
3,0 g |
|
Agar |
13 g |
|
D-Glucose |
0,5 g |
|
D-Mannit |
10,0 g |
|
Äskulin |
0,8 g |
|
Ammoniumeisen(III)-citrat |
0,5 g |
|
Phenolrot |
0,08 g |
|
Lithiumchlorid |
15,0 g |
|
Aqua dest |
960 ml |
|
pH 7,2 +/- 0,2 |
PALCAM-Listeria-Selektivsupplement (Merck Art.Nr. 1.12122.0001)
|
Polymyxin-B-sulfat-Lösung |
10 ml |
|
Natriumceftazidim-Pentahydtrat-Lösung |
20 ml |
|
Acriflavin-Hydrochlorid-Lösung |
10 ml |
|
| [Seite 227↓] |
TSYEA Trypton-Soja-Hefe-Extrakt-Agar
|
Trypton |
17,0 g |
|
Sojapepton |
3,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Dikaliumhydrogenphospht |
2,5 g |
|
Glukose |
2,5 g |
|
Hefeextrakt |
6,0 g |
|
Agar |
12,0 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,3+/- 0,2 |
TSYEB Trypton-Soja-Hefe-Extrakt-Bouillon
|
Trypton |
17,0 g |
|
Sojapepton |
3,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Dikaliumhydrogenphospht |
2,5 g |
|
Glukose |
2,5 g |
|
Hefeextrakt |
6 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,3+/- 0,2 |
Bluragar-Basis Nr.2+ defibriniertes Schafblut (OXOID CM 271)
|
Fleischpepton |
15 g |
|
Leberabbauprodukt |
2,5 g |
|
Hefeextrakt |
5 g |
|
Natriumchlorid |
5 g |
|
Agar |
12 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
defibriniertes Schafblut: 5ml bis 10ml in 100ml Grundmedium
Kohlenhydrat-Bouillon
(L-Rhamnose oder D-Xylose)
|
Proteose-pepton |
10 g |
|
Fleischextrakt |
1 g |
|
Natriumchlorid |
5 g |
|
Bromkresolpurpur |
0,02 g |
|
Kohlenhydtrat |
5 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
Beweglichkeitsmedium für Listeriennachweis
|
Caseinpepton |
20,0 g |
|
Fleischpepton |
6,1 g |
|
Agar |
3,5 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,3 +/0,2 |
|
| [Seite 228↓] |
Magnesiumchlorid-Malachitgrün-Medium nach Rappaport-Vassiliades
Lösung A
|
Trypton oder Sojapepton |
4,5 g |
|
Natriumchlorid |
8,0 g |
|
Kaliumdihydrogenphosphat (KH2PO4) |
1,6 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
Lösung B
|
Magnesiumchlorid-Hexahydrat (MgCl2.6HO) |
400 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
Lösung C
|
Malachitgrün-Oxalat |
0,4 g |
|
Aqua dest. |
100 ml |
Vollständiges Medium
|
Lösung A |
1000 ml |
|
Lösung B |
100 ml |
|
Lösung C |
10 ml |
|
pH 5,2 |
Brillantgrün-Phenolrot-Lactose-Saccharose-Agar (BPLS) nach Edel und Kampelmacher (Merck Art.Nr.1.07237.0500)
|
Pepton aus Fleisch |
5,0 g |
|
Pepton aus Casein |
5,0 g |
|
Fleischextrakt |
5,0 g |
|
Natriumchlorid |
3,0 g |
|
di-Natriumhydrogenphpsphat (Na2HPO4) |
2,0 g |
|
Lactose |
10,0 g |
|
Saccharose |
10,0 g |
|
Phenolrot |
0,08 g |
|
Brillantgrün |
0,0125g |
|
Agar |
12,0 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 6,9+/-0,2 |
|
| [Seite 229↓] |
XLD-Agar Xylose-Lysin-Desoxycholat-Agar, (Merck Art.Nr. 1.05287.0500)
|
Hefeextraxt |
3,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
D(+)-Xylose |
3,5 g |
|
Lactose |
7,5 g |
|
Saccharose |
7,5 g |
|
L(+)-Lysin |
5,0 g |
|
Natriumdesoxycholat |
2,5 g |
|
Natriumthiosulfat |
6,8 g |
|
Ammoniumeisen(III)-citrat |
0,8 g |
|
Phenolrot |
0,08 g |
|
Agar |
13,5 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,4+/- 0,2 |
O/F-Agar-Basis (OXOID Art.-Nr.CM 883)
|
Caseinpepton |
2,0 g |
|
Natriumchlorid |
5,0 g |
|
Dikaliumhydrogenphosphat |
0,3 g |
|
Bromthymolblau |
0,08 g |
|
Agar |
2,0 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 6,8 +/- 0,2 |
+ sterilfiltrierte Lösung von Glucose, Lactose oder Saccharose
9,4 g in Aqua dest. suspendieren und bis zum vollständigen Lösen erhitzen. Zu je 100 ml abfüllen und 15 min bei 121°C autoklavieren. Abkühlen lassen und jeweils 10 ml einer 10%-igen, sterilfiltrierten Lösung von Glucose, Lactose oder Saccharose zufügen. Zu 5 ml in Röhrchen abfüllen.
AHM (Aeromonas hydrophila-Medium)
|
Proteose-Pepton |
5 g |
|
Hefeextrakt |
3 g |
|
Trypton |
10 g |
|
L-Ornithin.HCl |
5 g |
|
Mannit |
1 g |
|
Inosit |
10 g |
|
Natriumthiophosphat |
0,4 g |
|
Eisen(III)-ammoniumcitrat |
0,5 g |
|
Bromkresolpurpur |
0,02 g |
|
Agar |
3 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
ph 6,7 +/- 0,2 |
Zu 5 ml in Röhrchen abfüllen, autoklavieren und als Hochschicht erkalten lassen.
|
| [Seite 230↓] |
Äsculin-Bouillon
|
Fleischpepton |
10 g |
|
Äsculin |
1 g |
|
Eisen-(II)-citrat (grün) |
0,3 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 7,4 +/- 0,1 |
Zu 4 ml in Röhrchen abfüllen, autoklavieren.
Für
-Gas aus Glucose
-Salicinfermentation
-Arabinosehydrolyse:
Hottinger-Bouillon (Grundsubstrat)
|
NACl |
2,5 g |
|
K2HPO4 |
1,24 g |
|
Proteose-Pepton |
10 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
Indikator: 0,1%-ige Bromthymolblaulg. |
40 ml |
|
ph 7,5 +/- 0,1 |
+ 1% der entsprechenden Substanz (Glucose, Salicin, Arabinose )
Zu 5 ml in Röhrchen abfüllen, autoklavieren; in die Glucose enthaltenden Röhrchen zum Nachweis der Gasbildung Durham-Gärröhrchen geben.
Voges-Proskauer-Bouillon, MR-VP-Bouillon Basis (Merck Art.Nr. 5712)
|
Pepton aus Fleisch |
7,0 g |
|
Glucose |
5,0 g |
|
Dikaliumhydrogenphosphat |
5,0 g |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 6,9 +/- 0,1 |
Auflösen, zu 5 ml in Reagenzröhrchen abfüllen, autoklavieren.
Lysindecarboxylase(LDC)-Bouillon
|
Bacto-Hefeextrakt |
0,5 g |
|
K2HPO4 |
0,5 g |
|
(NH4)2SO4 |
1,0 g |
|
Glucose |
1,5 g |
|
L-Lysinmonohydrochlorid(Merck Art.Nr.5700) |
20 g |
|
1%-ige Bromkresolpurpur.Lsg. |
4 ml |
|
Aqua dest. |
1000 ml |
|
pH 6,8 +/- 0,2 |
Zu 2 ml in Röhrchen abfüllen, mit Paraffinöl überschichten und autoklavieren.
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| DiML DTD Version 3.0 | Zertifizierter Dokumentenserver der Humboldt-Universität zu Berlin | HTML-Version erstellt am: 20.11.2003 |