1.  Einleitung

• 1.1. Das Mammakarzinom

  • 1.1.1. Ausgangspunkt der Untersuchung

  • 1.1.2.  Häufigkeit, Pathologie, Lokalisation

  • 1.1.3. Ätiopathogenese

    • 1.1.3.1. Familiäre Faktoren

    • 1.1.3.2. Strahlenexposition

    • 1.1.3.3. Fett- und Fleischgehalt in der Nahrung

    • 1.1.3.4. Alkohol

    • 1.1.3.5. Hormonelle Faktoren

    • 1.1.3.6.  Orale Kontrazeptiva und Östrogensubstitution

    • 1.1.3.7.  Benigne Brusterkrankungen

    • 1.1.3.8. Genetische Disposition

    • 1.1.3.9.  Nikotinkonsum

• 1.2.  Die Arylamin-N-Acetyltransferasen (NAT)

  • 1.2.1. Bedeutung im Fremdstoffwechsel

  • 1.2.2. Genetik der NAT

  • 1.2.3. Mutationen und Haplotypen am NAT2-Locus

• 1.3. Der Acetyliererstatus als möglicher Suszeptibilitätsfaktor für das Mammakarzinom und andere Karzinome

• 1.4.  Klinisch wissenschaftliche Fragestellung

2.  Material und Methode

• 2.1. Patientenkollektiv

• 2.2.  Kontrollkollektiv

• 2.3.  Material

• 2.4.  Methode

  • 2.4.1. DNA-Isolierung

  • 2.4.2. Genotypisierung der NAT2-Mutationen

• 2.5.  Statistik

• 2.6. Ethische Grundlagen und Datenschutz

3.  Ergebnisse

• 3.1. Genotypisierung der Arylamin-N-Acetyltransferase 2 bei Mammakarzinom- und Kontrollpatientinnen

• 3.2.  Stratifizierung nach dem Alter

• 3.3. Stratifizierung nach dem Ausmass des Zigarettenkonsum

• 3.4. Stratifizierung nach Blutgruppenmerkmalen

• 3.5.  Stratifizierung innerhalb des Mammakarzinomkollektivs

  • 3.5.1. Menopause

  • 3.5.2. Menstruationsdauer

  • 3.5.3.  TNM-Klassifikation

  • 3.5.4. Grading

  • 3.5.5. Tumorhistologie

  • 3.5.6. Hormonrezeptorstatus

4.  Diskussion

• 4.1. Verteilung der Acetylierergenotypen bei Mammakarzinom-Patientinnen in Abhängigkeit von individuellen Bedingungen.

• 4.2. Assoziationen des schnellen NAT2-Genotyps mit der Tumorhistologie bei Mammakarzinomen

• 4.3. Assoziationen des schnellen NAT2-Genotyps mit dem Hormonrezeptorstatus bei Mammakarzinomen.

• 4.4. Assoziationen des schnellen NAT2-Genotyps mit Zigarettenkonsum

• 4.5.  Stratifizierungen innerhalb des Mammakarzinomkollektivs

• 4.6. Toxifizierung von Fremdstoffen zu Karzinogenen in der Ätiopathogenese des Mammakarzinoms

5.  Zusammenfassung

Tabelle 1: Nukleotidtransitionen am NAT2-Genort

Tabelle 2: Varianten von Haplotypen am NAT2-Genort in der kaukasischen Bevölkerung

Tabelle 3: Liste bekannter NAT2-Haplotypen (erstellt von dem für Nomenklatur und Registrierung der Arylamin-N-Acetyltransferasen zuständige Komitee: Hein DW, Grant DM, Sim E, 2000), mit Angaben zum vorhersagbaren Phänotyp (Fretland AJ, Leff MA, Doll MA, Hein DW; 2001), sowie mit Hinweis auf die funktionale Charakteristik des Polymorphismus einzelner Nukleotide der menschlichen Arylamin-N-Acetyltrans-ferase.

Tabelle 4: Stadieneinteilung der AJC/UCC

Tabelle 5: Anamnestische Daten der Patientinnen mit Mammakarzinom

Tabelle 5: Demographische Daten beim Mammakarzinom und bei den Kontrollen

Tabelle 6: Oligonukleotid-Primer zur Amplifikation des kodierenden Abschnitts des NAT2-Gens und Amplifikation von kleinen Fragmenten, die mögliche Mutationen bei Positionen 191, 282, 341, 590 und 803 enthalten. Positionen 481 und 857 wurden direkt am 1.211-bp-Fragment geprüft.

Tabelle 7: Restriktionsendonukleasen zur Erkennung der NAT2-Mutation

Tabelle 8: Häufigkeitsverteilung der NAT2-Allele bei 248 Mammakarzinompatientinnen und 248 Kontrollen.

Tabelle 9: Häufigkeitsverteilung der NAT2-Genotypen bei 248 Mammakarzinompatientinnen und 248 Kontrollen

Tabelle 10: Häufigkeit der NAT2-Genotypen unter den 248 Mammakarzinom-Patientinnen und den 248 Kontrollen

Tabelle 11: Verteilung der schnellen Acetylierergenotypen in Abhängigkeit vom Alter

Tabelle 12: Verteilung der schnellen Acetylierer in der Gruppe der Mammakarzinom-Patientinnen und der Kontrollen in Abhängigkeit von der Rauchergewohnheiten

Tabelle 13: Verteilung der schnellen Acetylierer bei Mammakarzinomfällen und Kontrollen in Abhängigkeit von Blutgruppenmerkmalen

Tabelle 14: Verteilung der schnellen Acetylierer bei prä- und postmenopausalen Fällen im Kollektiv der Mammakarzinome

Tabelle 15: Verteilung der schnellen Acetylierer in Abhängigkeit von der Menstruationsdauer

Tabelle 16: Verteilung der schnellen Acetylierer in Abhängigkeit vom Tumor-stadium im Kollektiv der Mammakarzinome

Tabelle 17: Verteilung der schnellen Acetylierer in Abhängigkeit vom Grading im Kollektiv der Mammakarzinome

Tabelle 18: Verteilung der schnellen Acetylierer in Abhängigkeit von der Tumorhistologie im Kollektiv der Mammakarzinome

Tabelle 19: Verteilung der schnellen Acetylierer in Abhängigkeit vom Hormonrezeptorstatus im Kollektiv der Mammakarzinome

Abb.1: 2% Agarose-Gelelektrophorese von 1.211-bp-Fragmenten, die zur Überprüfung der Mutationen an NAT2-Genposition 481 nt mit Kpnl bzw. 857 nt mit BamHI verdaut wurden. Die Fragmente wurden durch Anfärbung mit 1mg/l Ethidiumbromid sichtbar gemacht.

Abb.2: 3% Agarose-Gelelektrophorese von 442-bp-Fragmenten, die zur Überprüfung der Mutationen an NAT2-Genposition 191 nt mit Mspl, 282 nt mit Fokl bzw. mit Ddel verdaut wurden. Die Fragmente wurden durch Anfärbung mit 1mg/l Ethidiumbromid sichtbar gemacht.

Abb.3: 3% Agarose-Gelelektrophorese von 421-bp-Fragmenten, die zur Überprüfung der Mutationen an NAT2-Genposition 590 nt mit Taqål und 803 nt mit Ddel verdaut wurden. Die Fragmente wurden durch Anfärbung mit 1mg/l Ethidiumbromid sichtbar gemacht.

Abb.4: Häufigkeitsverteilung der langsamen, schnellen und homzygot schnellen Azetylierer-genotypen in Mammakarzinom- und Kontrolltypen

Abb. 5: Metabolisierungswege von Arylaminen (nach Hein et al., 1993)