| Autor(en): |
Haike Dannowski |
Titel: |
Gentransfer in korneale Endothelzellen |
| Gutachter: |
Richard Lucius; Thomas Ritter; Uwe Pleyer |
| Erscheinungsdatum: |
10.11.2004 |
| Volltext: |
html
(urn:nbn:de:kobv:11-10037396)
pdf
(urn:nbn:de:kobv:11-10034574)
xml
(urn:nbn:de:kobv:11-10037405)
|
| Fachgebiet(e): |
Biowissenschaften, Biologie |
| Schlagwörter (ger): |
Keratolastik, korneales Endothel, aFGF, vIL-10, Adenovirus, kationische Lipide, Gentransfer |
| Schlagwörter (eng): |
Keratoplasty, corneal endothelium, aFGF, vIL-10, adenovirus, cationic lipids, gene transfer |
| Einrichtung: |
Humboldt-Universität zu Berlin, Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät I |
| Zitationshinweis: |
Dannowski, Haike:
Gentransfer in korneale Endothelzellen;
Dissertation,
Humboldt-Universität zu Berlin, Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät I , publiziert am 10.11.2004, urn:nbn:de:kobv:11-10037405
|
Metadatenexport:
 Um
den gesamten Metadatensatz im Endnote- oder
Bibtex-Format zu speichern,
klicken Sie bitte auf den entsprechenden Link.
|
Endnote
Bibtex
|
| print on demand:
Wenn
Sie auf dieses Icon klicken, können Sie
ein Druckexemplar dieser Publikation bestellen.
|
|
| Diese Seite taggen:
Diese
Icons führen auf so genannte Social-Bookmark-Systeme, auf denen Sie
Lesezeichen anlegen, persönliche Tags vergeben und Lesezeichen anderer Nutzer
ansehen können.
|
|
| Abstract (ger): |
| Bei der Hornhauttransplantation (Keratoplastik) handelt es sich um die häufigste
Transplantation humanen Gewebes. Das Hornhautendothel, eine empfindliche Zellschicht auf
der Innenseite der Kornea, verfügt nicht über die Fähigkeit, Zellverluste durch Proliferation
auszugleichen. Zwei grundsätzliche Probleme ergeben sich aus dieser Eigenschaft des
kornealen Endothels für die Keratoplastik: ein Endothelzellverlust tritt zum einen während der
Hornhautkonservierung vor Keratoplastik auf und führt zu einem Ausschluss vieler
Transplantate, zum anderen ist er oftmals im Zuge von immunvermittelten
Abstoßungsreaktionen oder in Folge chronischer Vorgänge nach Keratoplastik zu beobachten.
Aus diesem Grund ist eine möglichst hohe Endothelzelldichte auf kornealen Transplantaten
eine Voraussetzung für den Erfolg einer Keratoplastik.
Das erste Ziel dieser Arbeit war deshalb die Übertragung des Gens für den aziden FGF
(aFGF) in korneale Endothelzellen mit Hilfe des nicht-viralen Gentransfers. Dazu wurden
verschiedene Lipid-Formulationen für den Gentransfer in humane korneale Endothelzellen in
vitro optimiert. Der Einsatz von DAC-30 und Lipofectin für den aFGF-Gentransfer führte zu
einer deutlichen Proliferationssteigerung (um ca. 50 %) der Zellen, womit der Einsatz dieses
Wachstumsfaktors eine gute Möglichkeit darzustellen scheint, die prä-operative
Ausgangssituation kornealer Transplantate zu verbessern.
Der zweite Teil dieser Arbeit befasste sich mit Untersuchungen zur Immunmodulation nach
Keratoplastik. Eine Hauptrolle bei der Abstoßung kornealer Transplantate spielen CD4+ T-
Lymphozyten. In anderen Transplantationsmodellen konnte durch die lokale Überexpression
immunmodulatorischer Zytokine die Entstehung und Aktivierung dieser Zellen gehemmt und
eine verlängerte Transplantatüberlebenszeit erzielt werden. Mit Hilfe gentherapeutischer
Vektoren (Adenoviren, Liposomen) wurden die immunmodulatorischen Zytokine vIL-10 und
rIL-4 ex vivo in korneale Transplantate eingebracht. Nach erfolgreichen in vitro-
Untersuchungen zur Genexpression wurden die transduzierten/transfizierten Hornhäute in
einem starken Abstoßungsmodell der Ratte transplantiert, was jedoch zu keiner signifikanten
Verlängerung der Transplantatüberlebenszeit führte.
Diese Arbeit liefert Hinweise darauf, dass der lokale Gentransfer von vIL-10 in der
Keratoplastik nicht für eine Immunmodulation geeignet ist, und dass sowohl die Zytokindosis,
als auch der Zeitpunkt und der Ort der Vektorapplikation eine entscheidende Rolle für den
Transplantationserfolg spielen.
|
| Abstract (eng): |
| Keratoplasty is the most common transplantation of human tissue. The corneal endothelium
constitutes a damagable cell layer on the inner surface of the cornea, unable to proliferate.
From this, two general problems arise for the outcome of keratoplasty: loss of corneal
endothelial cells occurs on the one hand during corneal long time storage before keratoplasty
and enforces the lack of donor tissue, on the other hand it is often correlated with immune
mediated rejections as well as with chronic processes after keratoplasty. Therefore an
endothelial cell number as high as possible on corneal grafts displays a requirement for
successful keratoplasties.
The first aim of this study was non-viral gene transfer of the aFGF (acidic FGF) gene in
corneal endothelial cells. Different lipid formulations were optimized for gene transfer in
human corneal endothelial cells in vitro. Application of DAC-30 and Lipofectin for aFGF
gene transfer clearly showed a stimulating effect on cell proliferation (approximately 50 %).
Thus, the use of aFGF seems to be a good possibility for improving the pre-operative situation
of corneal allografts.
The second part of this study deals with the immune modulation after keratoplasty. CD4+ T-
lymphocytes play a key role in rejection processes after keratoplasty. Local over expression of
immunomodulatory cytokines in different transplantation models could inhibit the
development and activation of these cells and was able to prolong the allograft survival time.
Using different gene therapeutic vectors (adenoviruses, liposomes) the immunomodulatory
cytokines vIL-10 and rIL-4 were transferred ex vivo in corneal allografts. After successfully
determined gene expression in vitro, the transduced/transfected corneal allografts were
transplanted in a strong rejection model of the rat. However, this was not sufficient in
prolonging the graft survival time significantly.
This study provides indications, that local gene transfer of vIL-10 in keratoplasty is not
suitable for an immune modulation, and that both cytokine dose as well as time point and site
of vector application play an important role for successful transplantation.
|
Zugriffsstatistik:
Die Daten für die Zugriffsstatistik der einzelnen Dokumente
wurden aus den durch AWStats aggregierten Webserver-Logs erstellt.
Sie beziehen sich auf den monatlichen Zugriff auf den Volltext sowie
auf die Startseite. Die Zugriffsstatistik wird nicht standardisiert erfasst und kann maschinelle Zugriffe enthalten.
Bei Formatversionen eines Dokuments, die aus mehreren Dateien bestehen
(insbesondere HTML), wird jeweils der monatlich höchste Zugriffswert
auf eine der Dateien (Kapitel) des Dokuments angezeigt.
Um die detaillierten Zugriffszahlen zu sehen,
fahren Sie bitte mit dem Mauszeiger
über die einzelnen Balken des Diagramms.
|
   | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Jun
11 | Jul
11 | Aug
11 | Sep
11 | Oct
11 | Nov
11 | Dec
11 | Feb
12 | Apr
12 | May
12 | Jun
12 | Jul
12 | Aug
12 | Sep
12 | Oct
12 | Nov
12 | Dec
12 | Jan
13 | Feb
13 | Mar
13 | Apr
13 | May
13 |
| Monat | Jun
11 | Jul
11 | Aug
11 | Sep
11 | Oct
11 | Nov
11 | Dec
11 | Feb
12 | Apr
12 | May
12 | Jun
12 | Jul
12 | Aug
12 | Sep
12 | Oct
12 | Nov
12 | Dec
12 | Jan
13 | Feb
13 | Mar
13 | Apr
13 | May
13 | | Startseite | 4 | 7 | | 6 | | 6 | 2 | | 9 | | 1 | 4 | 2 | | 1 | 7 | | | | 1 | 2 | 1 | | HTML | 148 | 82 | 51 | 64 | 104 | 131 | 105 | 127 | 84 | 102 | 161 | 64 | 50 | 64 | 72 | 132 | 93 | 130 | 89 | 84 | 78 | 72 | | PDF | 4 | 3 | 3 | 5 | 9 | 14 | 6 | 11 | 10 | 6 | 20 | 9 | 4 | 14 | 29 | 26 | 5 | 17 | 23 | 39 | 26 | 29 |
Gesamtzahl der Zugriffe seit Jun 2011: - Startseite – 53 (2.41 pro Monat)
- HTML – 2087 (94.86 pro Monat)
- PDF – 312 (14.18 pro Monat)
|
