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Dissertation

Autor(en): Corina Kojetinsky
Titel: Untersuchungen zur Nachstarprävention in vitro mittels des zyklischen RGD-Peptids cRGD D FV
Gutachter: D. T. Pham; K. Engelmann; P. Rieck
Erscheinungsdatum: 24.05.2002
Volltext: html (urn:nbn:de:kobv:11-10017251)
pdf (urn:nbn:de:kobv:11-10017268)
Fachgebiet(e): Medizin
Schlagwörter (ger): Adhäsion, Nachstar, RGD-Peptid, Linsenepithelzellen
Schlagwörter (eng): adhesion, Posterior capsule opacification, RGD-peptide, Lens epithelial cells
Einrichtung: Humboldt-Universität zu Berlin, Medizinische Fakultät - Universitätsklinikum Charité
Zitationshinweis: Kojetinsky, Corina: Untersuchungen zur Nachstarprävention in vitro mittels des zyklischen RGD-Peptids cRGD D FV; Dissertation, Humboldt-Universität zu Berlin, Medizinische Fakultät - Universitätsklinikum Charité , publiziert am 24.05.2002, urn:nbn:de:kobv:11-10017268
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Abstract (ger):
Hintergrund: RGD-Peptide hemmen kompetitiv die Adhäsionsmoleküle von Linsenepithelzellen (LEC). Ziel unserer Untersuchungen war es herauszufinden, ob diese Peptide in der Lage sind, auch nach Kurzzeitinkubation eine suffiziente Inhibition der Adhäsion bzw. eine Ablösung adhärenter Zellen und damit eine ausreichende Prävention des Nachstars zu bewirken. Außerdem wurde überprüft, ob das von uns verwendete RGD-Peptid eine Toxizität für die Hornhaut aufweist. Material und Methoden: Kulturen boviner und humaner LEC, boviner Hornhautendothelzellen, humane und bovine Linsenkapselexzidate und humane explantierte Hornhäute wurden verwendet. Wir untersuchten die Inhibition der Adhäsion und die Ablösung konfluenter LEC-Layer mittels des zyklischen RGD-Peptids cRGDDFV (Inkubationszeiten von 1 Stunde bzw. 5-7 Tagen und Konzentrationen von 10-4 M, 10-3 M und 2x10-3 M wurden angewandt). Ergebnisse: Wir fanden nach nur einstündiger Inkubation in der Kulturschale eine Adhäsionsinhibition von 48% für bovine LEC und von 100% für humane LEC. Die Differenz zwischen Kontrollpeptid und cRGDDFV war statistisch signifikant (p<0,0001). Eine vollständige Lösung der Zellen gelang von der Kulturschale nach 37 Minuten, von Linsenkapseln jedoch nicht. Nachstarzellen ließen sich nach 3 Tagen Inkubation mit RGD-Peptid und durch zusätzliche Spülung vollständig vom Kapselsack lösen. Humane Hornhäute wiesen keinerlei Defekte im Endothel bzw. Epithel nach 48 Stunden Inkubation mit cRGDDFV 2x10-3 M auf. Schlußfolgerung: Eine Kurzzeitinkubation der LEC mit cRGDDFV führte in vitro zu keiner ausreichenden Hemmung der Adhäsion der LEC. Die Lösung bereits adhärenter LEC mittels cRGDDFV gelang nicht. Somit scheint ein Einsatz des von uns verwendeten RGD-Peptids zur Prävention des Nachstars nicht erfolgversprechend. Ob eine Verwendung von cRGDDFV zur erleichterten Nachstarabsaugung sinnvoll ist, sollte in weiteren in-vivo Untersuchungen geprüft werden.
Abstract (eng):
Purpose: RGD-peptides competitively inihibit adhesion molecules of the lens epithelial cells (LEC). The purpose of our study was to investigate whether this peptide could be able to inhibit adhesion sufficiently after short term incubation resp. to detach adherent cells and so to prevent posterior capsule opacification (PCO). Also there was proofed if there is any toxicity for the cornea. Methods: Cultures of bovine and human LEC, bovine cornea endothelial cells, humane and bovine fragments of the lens capsule and explanted humane corneas were used. The inhibition of adhesion and the detachment of confluent LEC-layer by the cyclic RGD-peptide cRGDDFV were studied (incubation time was 1 hour resp. 5-7 days and concentrations of 10-4, 10-3 M and 2x10-3 M were used). Results: After one hour incubation time in a culture dish inhibition of adhesion was 48% for bovine LEC resp. 100% for humane LEC. There was a statistically significant difference between the control-peptide-group and cRGDDFV (p<0,0001). Cell-detachment from lens capsules was not achieved, but complete detachment from the culture dish occured after 37 minutes. Transformed LEC in a lens capsule with PCO could be detached completely after 3 days incubation with RGD-peptide and a flushing of the capsule. There were no defects in endothelium nor epithelium of humane corneas after 48 hours incubation with 2x10-3 M cRGDDFV. Conclusions: Short-term incubation of LEC by cRGDDFV did not lead to a sufficient inhibition of adhesion in vitro. A detachment of adherent LEC by cRGDDFV was not achieved. Therefore we believe there will be no success of the RGD-peptide used by us in prevention of PCO. To investigate if there is an effect in PCO therapy in-vivo studies are needed.
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