Show simple item record

2024-04-17Dissertation DOI: 10.18452/28531
Energetic and Microscopic Characterization of the Primary Electron Transfer Reaction in the (6-4) Photolyase Repair Reaction
dc.contributor.authorOßwald, Mara
dc.date.accessioned2024-04-17T09:15:09Z
dc.date.available2024-04-17T09:15:09Z
dc.date.issued2024-04-17none
dc.identifier.urihttp://edoc.hu-berlin.de/18452/29142
dc.description.abstractWird DNA mit UV-Licht bestrahlt, kommt es zur Bildung von Photoschäden, die zu Zelltod oder Krebs führen können. In dieser Arbeit wird die primäre Elektronentransferreaktion des lichtaktivierten Reparaturprozesses des (6-4)-Schadens in Drosophila melanogaster charakterisiert. Der katalytische Reparaturzyklus wird durch das Flavoprotein (6-4)-Photolyase (PL) realisiert. Der Elektronentransfer (ET) vom Flavin-Adenin-Dinukleotid (FADH⁻) Kofaktor zum Schaden initiiert die molekularen Umlagerungen. Diese Arbeit charakterisiert die primäre ET Reaktion mithilfe von molekulardynamischen Langzeitsimulationen (µs) in Kombination mit Quantenmechanik/Molekularmechanik-Simulationen. Ab initio lokale Coupled-Cluster- und Dichtefunktionaltheorierechnungen wurden angewendet, um die relative Energetik von lokal angeregten und Ladungstransferzuständen des (6-4)-Reparaturkomplexes zu charakterisieren. Es zeigt sich, dass die Reduktion des (6-4)-Schadens durch einen Ladungstransferzustand ermöglicht wird an dem die Adeninstruktur des FADH⁻ -Kofaktors beteiligt ist. Über die Simulationen wird ein mikroskopisches Bild der Reaktionskoordinate der Elektronentransferreaktion im Marcusbild entwickelt. Diese ist nicht vollständig durch parabolische freie Energiekurven beschrieben sondern wird, durch Wechselwirkungen in der aktiven Tasche, ein Multiminima-Reaktionspfad ausgebildet. Hierbei hat die Rotation der Seitenkette der benachbarten, geladenen Aminosäure Lys246 dominanten Einfluss. Dies legt nahe, dass die primäre ET Reaktion der (6-4) Schadensreparatur, einen vom Adenin unterstützten ET Weg von der PL zur 5’ Seite des Schadens nimmt. Dieser Prozess wird durch benachbarte Aminosäuren und einer Stärkung der Wasserstoffbrücken mit Wassermolekülen stabilisiert. Die Ergebnisse dieser Arbeit zeigen, dass ET-Reaktionen in komplexen enzymatischen Systemen nicht im Kontinuumsbild von ET beschrieben werden können, da lokale Wechselwirkungen drastischen Einfluss auf die ET Reaktionen haben.ger
dc.description.abstractUV-light irradiation of DNA leads to the formation of photolesions that can cause cell death and cancer. This thesis aims at the characterization of the primary electron transfer (ET) reaction in the photoactivated repair process of the (6-4) lesion in Drosophila melanogaster. The catalytic repair cycle is realized by a flavoprotein called photolyase (PL). The ET from the fully reduced flavin-adenine-dinucleotide (FADH⁻) cofactor of the PL to the lesion initiates molecular rearrangements. In this thesis fluctuation properties of the enzyme environment on the excited states are considered by conducting long-time (µs) molecular dynamics simulations combined with extensive quantum mechanical/molecular mechanical simulations. Ab initio local coupled cluster simulations and density functional theory are applied to characterize the relative energetics of locally excited and charge transfer (CT) states in the (6-4) lesion repair complex. Reduction of the (6-4) lesion is found to be enabled by a CT state involving the adenine moiety of the FADH⁻ cofactor. Microscopic characterization of a Marcus-type free energy reaction coordinate reveals that it cannot be fully described by parabolic free energy curves. Specifically, rotation of the side chain of nearby charged amino acid Lys246 imposes a double-well character on the potential energy surface along the reaction coordinate of the ET. For the ET reaction triggering the catalytic (6-4) lesion repair, the findings of this thesis suggest an ET pathway to the 5’ side of the (6-4) lesion mediated by the adenine moiety. The process is stabilized by neighboring amino acids and a strengthening of hydrogen bonds with water molecules. The presented results demonstrate that ET reactions in complex enzymatic systems cannot be described within the continuum ET picture, as local interactions drastically tune the ET reaction.eng
dc.language.isoengnone
dc.publisherHumboldt-Universität zu Berlin
dc.rights(CC BY-SA 4.0) Attribution-ShareAlike 4.0 Internationalger
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/
dc.subjectDNSger
dc.subjectPhotoschadenger
dc.subjectQuantenchemieger
dc.subjectMolekulardynamikger
dc.subjectElektronentransferger
dc.subjectMarcus Theorieger
dc.subject(6-4) Schadenger
dc.subject(6-4) Photoproduktger
dc.subjectPhotolyaseger
dc.subjectReparaturprozessger
dc.subjectQM/MMger
dc.subjectDFTger
dc.subjectDichtefunktionaltheoryger
dc.subjectDNAeng
dc.subjectphotolesioneng
dc.subjectquantum chemistryeng
dc.subjectmolecular dynamicseng
dc.subjectelectron transfereng
dc.subjectMarcus theoryeng
dc.subject(6-4) lesioneng
dc.subject(6-4) photoproducteng
dc.subjectphotolyaseeng
dc.subjectrepair processeng
dc.subjectQM/MMeng
dc.subjectDFTeng
dc.subjectdensity functional theoryeng
dc.subject.ddc530 Physiknone
dc.subject.ddc541 Physikalische Chemienone
dc.titleEnergetic and Microscopic Characterization of the Primary Electron Transfer Reaction in the (6-4) Photolyase Repair Reactionnone
dc.typedoctoralThesis
dc.identifier.urnurn:nbn:de:kobv:11-110-18452/29142-5
dc.identifier.doihttp://dx.doi.org/10.18452/28531
dc.date.accepted2023-04-25
dc.contributor.refereeBusch, Kurt
dc.contributor.refereeFaraji, Shirin
dc.contributor.refereeFingerhut, Benjamin
local.edoc.pages178none
local.edoc.type-nameDissertation
dc.relation.issupplementedby10.1021/acs.jpcb.1c02951
bua.departmentMathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultätnone

Show simple item record